海洋生物Ⅰ号抗鼻咽癌活性成分的提取及其作用机制的探讨

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 本文采用渗漉法,将打碎的新鲜海洋生物Ⅰ号先用95﹪的食用乙醇提取出较粗的成分A、继而依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取分别得到三种不同的提取物B、C、D,然后用MTT法筛选出抗鼻咽癌作用最有效的活性成分(海洋生物Ⅰ号提取物C)。用以下方法研究海洋生物Ⅰ号提取物C对CNE-2Z细胞生长和分化的影响:①采用集落形成实验测定其对CNE-2Z细胞集落形成率的影响;②以细胞计数法观察提取物C对CNE-2Z细胞生长曲线的影响;③流式细胞术检测提取物C对CNE-2Z细胞周期分布的影响;④TRAP-ELISA法检测提取物C对CNE-2Z细胞端粒酶活性的影响;⑤RT-PCR法检测提取物C对CNE-2Z细胞hTERT mRNA、hTR mRNA、COX-2 mRNA和VEGF mRNA表达的影响;⑥Western blot法检测提取物C对CNE-2Z细胞c-Myc和P53表达的影响;⑦用免疫细胞化学涂片法检测提取物C对CNE-2Z细胞PKCα表达的影响;⑧用免疫细胞化学爬片法检测提取物C对CNE-2Z细胞角蛋白表达的影响。
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