目的:本研究旨在探索负载有人尿源性干细胞（USCs）的丝素蛋白（SF）-骨组织脱细胞外基质（D-ECM）-羟基磷灰石（HA）复合组织工程支架的物理学性能、生物相容性及干细胞生长迁徙模式,并以传统的二维平面细胞培养模式为基准,尝试探究复合支架三维培养模式下USCs的生长特性。方法:使用差速离心复合沉淀法获取USCs,使用倒置相差显微镜观察不同增殖阶段的细胞形态:采用流式细胞术检测USCs的表面标志物,对USCs进行成骨、成软骨、成脂肪细胞的分化诱导以完成尿源干细胞的鉴定。支架材料选取及处理使用了三元溶液工艺提取脱胶蚕丝中的丝素蛋白并进行透析提纯,采用机械震荡、生物酶消化的复合方式获得骨组织脱细胞外基质,添加一定比例羟基磷灰石后使用冷冻干燥技术制备复合支架。物理学性能评估使用了称重法于25 ℃恒温下测量支架孔隙率,使用模拟体液测量样本溶胀率,万能力学试验机压缩试验测定弹性模量,使用胰酶、溶菌酶及模拟体液评估降解性能。最终将尿源干细胞负载于支架,使用倒置相差显微镜、扫描电镜（SEM）及CCK-8法分别对载细胞支架的微观形貌及负载细胞生物活性进行评估。结合倒置相差显微镜、扫描电镜及荧光共聚焦显微镜对复合支架内部细胞生长模式、特性进行观察与评估。结果:平面培养模式下所提取细胞呈纺锤状或长梭状,流式细胞术结果显示CD29,CD44,CD73表达为阳性,所提取细胞可成功完成成骨、成脂、成软骨三向分化,鉴定为尿源干细胞。复合支架大体外观为海绵状,微观形貌表现为多孔状三维结构,并具有较高的孔隙率及溶胀率,压缩试验显示复合支架交联后弹性模量优异,降解实验则显示复合支架在多种液体环境下抗降解特性较佳。细胞与复合支架共培养显示支架生物相容性较平面培养为佳,利于细胞黏附及生长,复合支架三维培养模式下细胞生长同时存在一维、二维、三维三种模式,细胞行为较平面培养更贴合体内的真实情况。结论:所提取细胞鉴定为人尿源性干细胞,SF/D-ECM/HA复合支架具有优异物理学性能及生物相容性,负载尿源性干细胞的复合支架可完成干细胞体外三维培养的有效模拟,该培养模式较二维平面培养更接近体内真实情况。