同轴静电纺丝法制备ICA-SF/PLCL纳米纤维膜及体外成骨研究

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目的:制备ICA-SF/PLCL同轴静电纺丝纳米纤维膜,系统评估其理化性能、力学性能、体外释药及降解能力,细胞实验评价膜生物相容性及体外促成骨能力,为探讨该载药纳米纤维膜作为一种促进骨再生GBR屏障膜的可能性提供参考。方法:(1)基于课题组前期研究基础,在电压15 kV,接收距离15 cm,芯、壳层纺丝液推进速度分别为0.1 mL·h-1和1.0 m L·h-1,环境相对湿度65%,室温25℃的纺丝参数条件下,以10-5 mol·L-1的ICA溶液为芯层纺丝液,8%的SF/PLCL混合液(SF与PLCL质量比为30:70)为壳层纺丝液,制备了ICA-SF/PLCL载药纳米纤维膜;(2)应用扫描电镜(SEM)观察膜表面形貌;透射电镜(TEM)进一步检测复合纤维结构特征;利用电子万能力学测试仪评估膜力学性能;紫外可见分光光度计检测膜释放的ICA的量,探讨膜的释药能力;通过扫描电镜及万能力学测试仪检测膜表面形貌、力学性能随降解过程的改变,评估膜体外降解能力;(3)体外实验,通过扫描电镜观察及MTT检测,分析骨髓间充质干细胞(BMSCs)在膜表面的黏附及增殖状况,评价材料的生物相容性;进一步,利用茜素红染色实验及ALP活性检测实验,评估膜体外促成骨能力。结果:(1)成功制备了ICA-SF/PLCL同轴静电纺丝纳米纤维膜。(2)SEM检测发现,该膜表面形貌良好,由直径均一、分布均匀的纳米纤维构成了三维立体网状结构;TEM可观察到沿纤维长轴走向明显的芯-壳结构;接触角测试结果显示为125.72±4.93°,较纯PLCL纺丝膜亲水角小;力学性能测试检测结果显示,膜的拉伸强度约为5.54±0.46 MPa,可以满足临床GBR屏障膜的强度要求;释药结果显示,芯层ICA的释放可分为初期短暂的突释过程(0~5 d,达41.06%±0.06)和随后的缓慢、恒速释放过程(6~30 d,达82.09%±1.86),ICA释放时间明显延长;体外降解实验表明,伴随降解过程,膜表面逐渐变粗糙,甚至出现一些大小不一的孔洞,膜部分纤维断裂,其拉伸断裂强度呈下降趋势。(3)体外实验表明,BMSCs在膜表面黏附、生长状态良好;茜素红染色实验可观察到明显的橘红色钙化沉积物生成;ALP活性测试结果表明,细胞碱性磷酸酶活性明显升高。结论:利用同轴静电纺丝法可制备ICA-SF/PLCL纳米纤维膜,其表面形貌良好,亲水性能、力学性能优良,具有降解性及药物缓释效果,生物相容性优良,并具有体外促成骨能力。这种将GBR技术与生长因子、药物缓释技术联合应用制备的载药纳米纤维膜,有望成为一种新型、有效的促进骨再生的GBR屏障膜。
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