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目的：探讨人中性粒细胞多肽-1(HNP-1)能否诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达IL-8及其信号通路。方法：1.以浓度为10.00μg/ml的HNP-1干预HUVEC不同时间(Oh、3h、6h、9h、12h),再以不同浓度(0.625μg/ml,1.250μg/ml,2.500μg/ml,5.000μg/ml,10.00μg/ml)的HNP-1干预HUVEC12h,分别提取总RNA,采用RT-PCR法分别测定IL-8mRNA的相对表达量。2.采用RT-PCR法确定HUVEC表达P2Y6mRNA,以10.00μg/ml的HNP-1干预HUVEC12h,采用RT-PCR法测定特异性P2Y6拮抗剂MRS2578预先干预HUVEC前后HNP-1诱导IL-8mRNA的相对表达量。3.采用RT-PCR法测定特异性MEK抑制剂、PI3K抑制剂干预HUVEC前后HNP-1诱导IL-8mRNA的相对表达量,采用western blot法测定HNP-1干预HUVEC后ERK1/2、AKT的磷酸化水平。4.采用western blot法测定P2Y6拮抗剂MRS2578干预HUVEC前后HNP-1诱导的ERK1/2的磷酸化水平。5.采用western blot法测定MEK抑制剂、PI3K抑制剂干预HUVEC前后HNP-1诱导的ERK1/2、AKT的磷酸化水平。结果：1.在12h内,随着干预时间的延长,IL-8的表达量逐渐增多,与空白组相比,各时间点的IL-8的表达量升高均有统计学意义(P<0.05)；随着HNP-1浓度的升高,IL-8的表达量亦逐渐升高,从浓度达到5μg/ml开始IL-8表达量的升高具有统计学意义(P<0.05)。2.HUVEC内存在P2Y6mRNA的表达,以不同时间及不同浓度的HNP-1干预,P2Y6mRNA的表达量无统计学差异。采用1μM的MRS2578预孵育,IL-8的表达受到轻微抑制但未达到统计学差异(P>0.05),而采用5μM的MRS2578预孵育,IL-8的表达受到明显抑制(P<0.05),但仍高于阴性对照组组(P<0.05)。3.预先采用MEK抑制剂、PI3K抑制剂孵育细胞,HNP-1干预后IL-8mRNA的表达量受到明显抑制(P<0.05)。HNP-1干预细胞后,ERK1/2的磷酸化程度明显增强,在5min达峰(P<0.05),而后随时间延长磷酸化程度逐渐减弱,而AKT却没有明显的磷酸化(P>0.05)。4. HNP-1干预细胞5min后,ERK1/2明显磷酸化(P<0.05),以1μM MRS2578预先孵育细胞,ERK1/2磷酸化程度无明显降低(P>0.05),而以5μM MRS2578预先孵育细胞,ERK1/2磷酸化程度明显降低(P<0.05)。5.HNP-1干预细胞5min后,ERK1/2而非AKT明显活化,以PI3K抑制剂阻断PI3K/AKT通路后,AKT的磷酸化几乎完全被抑制(P<0.05),而HNP-1诱导的ERK1/2的磷酸化水平亦有一定程度的降低(P<0.05),以MEK抑制剂阻断ERK1/2通路后,ERK1/2的磷酸化几乎完全被抑制,而AKT的磷酸化程度无明显改变(P>0.05)。结论：1.在一定时间及浓度范围内,HNP-1能够诱导HUVEC表达IL-8,且具有时间及浓度依赖性。2.HNP-1可能是通过P2Y6受体及PI3K-MAPK/ERK通路诱导HUVEC表达IL-8的。图24幅,表13个,参考文献49篇。