【摘 要】
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盘基网柄菌（Dictyostelium discoideum）是单细胞真核原生动物,它的生命周期包含生长和分化两个特殊的阶段。在营养丰富的情况下,盘基网柄菌以单细胞的二分裂方式进行繁殖；如果遇到饥饿等营养匮乏环境时,进入多细胞的发育阶段。细胞周期是指连续分裂的细胞从一次有丝分裂结束时到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程,通常分为间期和分裂期,其中细胞分裂间期包含G1期、S期和G2期。正常细胞中,在
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盘基网柄菌（Dictyostelium discoideum）是单细胞真核原生动物,它的生命周期包含生长和分化两个特殊的阶段。在营养丰富的情况下,盘基网柄菌以单细胞的二分裂方式进行繁殖；如果遇到饥饿等营养匮乏环境时,进入多细胞的发育阶段。细胞周期是指连续分裂的细胞从一次有丝分裂结束时到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程,通常分为间期和分裂期,其中细胞分裂间期包含G1期、S期和G2期。正常细胞中,在G1/S和G2/M期的转换以及S期的进行中有一套严格有效的周期检查点（cell cycle checkpoints）机制。盘基网柄菌的细胞周期有以下几个特点：1)极短或没有G1期；2)G2期时间相当长（约6.5h）；3)M期时间很短（15min或更少）；4)30min或更短的S期（Aboba,Sendai2011）。由此可推算盘基网柄菌的单细胞发育阶段G2/M期约占整个细胞周期的93.10%。Cdc25磷酸酶调控G2/M期的进程,ATR-Chk1-Cdc25信号通路是G2/M转变期的一条重要信号路径。盘基网柄菌突变型RNAi-allC细胞是笔者实验室使用RNA干扰技术作用于野生型KAx-3细胞,使其在转录时不能表达a11C基因。显微镜观察盘基网柄菌野生型KAx-3细胞和突变型RNAi-allC细胞,计数结果表明突变株RNAi-a11C单细胞繁殖速度约为野生株KAx-3的8倍。为探究盘基网柄菌细胞周期缩短的原因我们用荧光定量PCR和western blot研究了ATR-Chkl-Cdc25信号通路的作用。实验结果表明：RNAi-al1C细胞中cdc25基因相对表达量约为KAx-3细胞的8倍,而其Chkl与ATR基因的相对表达量明显低于KAx-3细胞。突变细胞中Cdc25蛋白含量高于KAx-3细胞,但其Chk1蛋白含量却显著低于KAx-3细胞。这些数据表明两种类型细胞中,ATR、Chk1、Cdc25在mRNA水平和蛋白表达上均存在差异,特别是ATR基因表达量的变化明显影响ChK1和Cdc25的表达量,提示ATR-Chkl-Cdc25信号通路在一定程度上参与了盘基网柄菌细胞周期G2/M期的调控。这对后续研究调控盘基网柄菌细胞周期的信号通路提供了参考。
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