通络汤治疗盆腔炎性疾病湿热蕴结型的实验研究

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目的:研究国家级名老中医梁文珍教授的自拟方通络汤对湿热蕴结型慢性盆腔炎大鼠血液流变学、血清中CD4+CD25+调节性T细胞数量百分比、细胞因子的影响以及Caspase-3蛋白、NF-κB蛋白在慢性盆腔炎模型大鼠子宫内膜组织中的表达。方法:选用非孕期成年雌性SD大鼠,体重200±20g,正常环境下饲养1周后随机分为模型组、正常组、通络汤低剂量组、通络汤中剂量组、通络汤高剂量组、对照组(桂枝茯苓丸组),每组10只,除正常组外,其余组均采用苯酚胶浆糊剂(由液化苯酚、甘油、黄芪树胶组成)建立慢性盆腔炎模型。造模后各组大鼠正常饲养10d,通络汤低剂量组给药10.8g/kg,通络汤中剂量组给药21.6g/kg,通络汤高剂量组给药43.2g/kg,桂枝茯苓丸组给药3.0g/kg,正常组和模型组给予等量生理盐水,每天1次,连续灌胃15d。于末次灌胃后给予禁食处理12h,后腹腔注射水合氯醛给大鼠进行麻醉,立即取出标本。观察各组大鼠子宫、卵巢等盆腔组织的组织形态学改变,用全自动血流变仪分析全血粘度、血浆粘度、红细胞压积、血沉方程K值,用酶联免疫吸附法检测血清中细胞因子(cytokines,CK):白细胞介素-8(Interleukin 8,IL-8)、白细胞介素-10(Interleukin 10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),用流式细胞仪检测血清中CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+regulatory T cell,CD4+CD25+Treg)数量百分比,用免疫组织化学分析检测各大鼠子宫内膜组织半胱氨酸蛋白酶-3(cysteine proteinase-3,Caspase-3)、核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)的表达状况。结果:1、与正常组比较,模型组各大鼠盆腔组织均呈炎性改变;与模型组比较,通络汤各给药组及桂枝茯苓丸组各大鼠盆腔组织炎性改变均有不同程度改善。2、与正常组比较,模型组大鼠的血液在各切变率下的全血粘度、血浆粘度、红细胞压积、血沉方程K值、血清中炎性因子IL-8、TNF-α以及子宫内膜组织中Caspase-3、NF-κB的表达均升高显著P<0.01或P<0.05),血清中抗炎因子IL-10的表达明显降低(P<0.01)。3、与模型组比较,通络汤中剂量组、高剂量组、桂枝茯苓丸组大鼠血清中IL-10、子宫内膜组织中Caspase-3的表达均明显升高(P<0.01或P<0.05),通络汤各剂量组、桂枝茯苓丸组大鼠在各切变率下的全血粘度、血浆粘度、红细胞压积、血沉方程K值、血清中IL-8、TNF-α以及子宫内膜组织中NF-κB的表达均降低明显(P<0.01或P<0.05)。结论:通络汤通过改善盆腔炎模型组大鼠血液流变学(全血粘度、血浆粘度、红细胞变形指数等)的变化,降低模型组大鼠血清中炎性因子TNF-α、IL-8、升高抗炎性因子IL-10的含量,通过Fas/FasL-Caspase-3介导的死亡受体通路促进子宫内膜组织炎细胞的凋亡,通过减轻NF-κB介导的炎症的的级联放大效应,通过下调模型组大鼠子宫组织CD4+CD25+Treg细胞数量百分比,减轻其免疫抑制,使大鼠对炎症的免疫反应得以发挥,以上各因子共同发挥作用,以达到治愈盆腔炎的目的。
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