论文部分内容阅读
本实验采用PCR-RFLP的方法,以250只新扬州鸡和43只来航鸡为素材对类胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因的5’端调控区进行遗传多态性研究,并对IGF-1基因多态性与鸡蛋用性状间的关系进行了关联分析,且从蛋白质水平探索了基因变异影响表形性状的途径;同时本实验采用RT-PCR的方法研究了IGF-1基因的组织表达规律。主要研究结果如下:1、PCR-RFLP分析表明,在新扬州鸡和来航鸡IGF-1基因5’非编码区存在PstI和HinfI两个酶切位点,PstI位点存在一个A-T突变,HinfI位点存在一个C-T突变。新扬州鸡PstI位点的等位基因A频率为0.3647,等位基因B频率为0.6353,HinfI位点的等位基因C频率为0.5780,等位基因D为0.4220;来航鸡PstI位点的等位基因A频率为0.2209,等位基因B频率为0.7791,HinfI位点的等位基因C频率为0.7674,等位基因D为0.2326。经χ2检验,新扬州鸡在两位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态,而来航鸡在PstI位点不符合Hardy-Weinberg平衡,在HinfI位点符合Hardy-Weinberg平衡。2、在开产性状方面,PstI位点基因型对开产性状有显著影响(P<0.05)。LSD分析表明,新扬州鸡BB型开产蛋重显著大于AB型(P<0.05),来航鸡BB型开产日龄显著早于AB型(P<0.05),BB型开产胫长显著大于AA和AB型(P<0.05)。HinfI位点基因型对新扬州鸡和来航鸡开产性状影响不显著(P>0.05)。3、PstI位点基因型对鸡产蛋数和产蛋量有显著影响(P<0.05),表现为来航鸡BB型29、39、49周产蛋数和29、39、49、59周产蛋量显著(P<0.05)甚至极显著(P<0.01)大于AA和AB型;BB和AB型新扬州鸡40周产蛋量显著大于AA型(P<0.05),而对于新扬州鸡30、40、50、60周产蛋数和30、50、60周产蛋量基因型间差异不显著(P>0.05),但BB和AB型均表现出高于AA型的优势。HinfI位点基因型对新扬州鸡50周产蛋数和50周产蛋量有显著影响,表现为CC型50周产蛋数和50周产蛋量显著大于CD型(P<0.05),而对于30、40、60周产蛋数和30、40、60产蛋量基因型间差异不显著(P>0.05),但CC型均表现出大于CD和DD型的优势。HinfI位点基因型对来航鸡各周产蛋数和产蛋量影响均不显著(P>0.05)。4、PstI位点基因型对新扬州鸡和来航鸡蛋品质有显著影响(P<0.05)。在研究指标中,新扬州鸡的蛋重、蛋白重、蛋黄重、蛋壳重、蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋壳颜色等指标的BB基因型效应均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)大于AA基因型。来航鸡的蛋白重、蛋壳重、蛋白比例、蛋形指数等指标的BB基因型效应均显著大于AA或AB型(P<0.05),而对于哈氏单位、蛋壳强度、蛋壳韧度AB型显著大于AA或BB型(P<0.05)。HinfI位点基因型对新扬州鸡和来航鸡蛋品质有显著影响(P<0.05)。新扬州鸡的蛋重、蛋白重、蛋黄重、蛋壳强度、蛋黄颜色、蛋形指数等指标的CC基因型效应均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)大于DD或CD型,而对于新扬州鸡40周蛋白比例、40周哈氏单位、60周蛋壳强度CD型效应显著大于DD型(P<0.05)。在该位点上,来航鸡59周蛋重、59周蛋白重、59周蛋黄重、39周蛋壳颜色的CD型效应显著大于CC型(P<0.05)。5、分析基因型与血清IGF-1浓度的关系发现,不同基因型鸡的血清IGF-1浓度差异不显著(P>0.05),但BB型血清IGF-1浓度在新扬州鸡20、40、58周均有高于AA型的趋势,且血清IGF-1浓度在基因型间的变化趋势与鸡蛋用性状在基因型间的变化趋势一致。6、RT-PCR分析表明,IGF-1基因在新扬州鸡公鸡的肝脏、睾丸、胸肌、腿肌、肺、小肠、心、脾、肾、垂体、肌胃均有表达;在新扬州鸡母鸡的肝脏、卵巢、胸肌、腿肌、肺、小肠、心、脾、肾、垂体、肌胃也均有表达。