【摘 要】
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本研究利用一段编码(G4S)3多肽的碱基linker将IBVS1和IBVM基因进行克隆。免疫荧光结果表明融合基因能够在细胞内进行表达。动物免疫试验共分6组：M组(免疫IBV M基因真核表达质
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本研究利用一段编码(G4S)3多肽的碱基linker将IBVS1和IBVM基因进行克隆。免疫荧光结果表明融合基因能够在细胞内进行表达。动物免疫试验共分6组：M组(免疫IBV M基因真核表达质粒)、S1-M组(PVAX-S1-linker-M融合基因真核表达质粒)、病毒对照组V(IBV-Beaudette株),PBS组,疫苗组,以及1个空载体对照组。免疫过程中利用淋巴细胞增殖试验、酶联免疫吸附试验、中和抗体试验以及利用流式细胞术检测CD4+、CD8+T淋巴细胞动态变化,对不同日龄的试验动物进行检测,最后用病毒攻击试验比较免疫不同质粒组别之间保护率。试验结果表明,4组免疫组各日龄多数免疫指标都高于空载体对照组和PBS组,对M组及S1M组比较时发现,S1-M组可以较早地诱导机体产生细胞免疫及体液免疫应答。PVAX-S1-linker-M组最为显著说明二价核酸疫苗对两种病毒的攻击有一定的保护作用,攻毒后对各试验组IBV靶器官进行了病理组织学研究,同时还对不同免疫组之间的免疫保护率进行了比较,结果进一步证明了PVAX-S1-linker-M能够很好地提高机体的免疫保护能力,抵御病毒感染的能力更为突出,表明在linker帮助下融合基因能够在机体内更好地发挥二者的生物学协同作用.综上,通过本试验研究表明,IBV抗原S1和M联合基因免疫不但能够促进机体的细胞免疫应答能力,而且能够提高机体体液免疫应答的能力,进而促进机体产生较强的免疫力以抵抗病毒的攻击。本试验结果为进一步探讨开发研制新型抗病毒疫苗提供了理论基础。
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