背景：胆管癌、胆囊癌是一类严重危害人类健康的肝外胆道系统疾病,占消化道肿瘤第5位,由于本疾病解剖部位特殊,症状不典型,早期确诊率很低,确诊时通常已经处于晚期,其5年生存率仅为2%,以上的患者在诊断后1年内死亡,预后极差,近年来虽然传统的治疗方法,如手术、放疗、化疗、免疫治疗,或者联合治疗取得较大的进展,但是患者的预后并无明显的改善,其主要原因是胆管癌确诊时多己发生浸润扩散或远处转移,失去了根治性切除的机会。对不能手术的晚期患者,行化疗和或姑息性手术,虽然可以提高患者的生活质量,但也只能延缓疾病发展,并不能从细胞源头上杀灭肿瘤细胞。因此,本实验从基因水平研究胆囊癌、胆管癌发生发展的分子机制,试图找出诱发促进胆囊癌和胆管癌发生发展的促癌基因,并探究癌基因的作用机制,为将来通过基因靶向治疗,从源头上阻断胆囊癌和胆管癌的发展,提高患者的生存率,提供一定的参考。Cyr61是一种分泌性基质蛋白,由381个氨基酸残基组成。Cyr61具有明显的促有丝分裂活性和趋化性,可诱导成纤维细胞增殖和分泌细胞外基质,参与调节细胞增生、分化、胚胎发育形成,是生命活动的基本蛋白。Cyr61是重要的细胞基质调节因子,存在于人类各种组织器官中,如胎盘、心、肺、脑、胰腺和结缔组织等,在胚胎肾组织中Cyr61含量较高,而在胃肠道、前列腺、肝脏、肾脏中其表达相对较低。Cyr61处于细胞内、外信号转导通路下游,调控内皮细胞和成纤维细胞的黏附、迁移与增殖,诱导血管发生,参与炎症反应、伤口愈合和组织重塑过程,并在多种肿瘤的发生、发展过程中发挥不同作用。目前对于Cyr61基因的研究报道较少,尚未见到该基因在肝外胆道系统肿瘤中表达的研究。目的：研究Cyr61基因在肝外胆道系统肿瘤中的表达及意义。实验方法：收集昆明医科大学第一附属医院2009年月至2012年9月间手术切除的胆囊癌及肝外胆管癌标本存档蜡块30例,其中胆囊癌18例,肝外胆管癌12例,另选取手术切除的正常胆囊及胆管组织30例。用免疫组化SP染色法染色、实时荧光定量PCR,定性定量分析Cyr61基因在人肝外胆道系统肿瘤及其正常组织中的表达及意义。结果：(1)免疫组织化学法结果：Cyr61在肝外胆道系统肿瘤和正常组织中均有表达。肝外胆道系统肿瘤30例均有表达,其中12例为(++),18例为(+),阳性率为100%。肝外胆道系统正常组织30例中,有4例为(+),其余26例均为(—),阳性率13.3%。Cyr61在肝外胆道系统肿瘤中的表达明显高于正常组织中(P<0.001)。(2)实时荧光定量RT-PCR结果：Cyr61mRNA的值采用相对值表示,通过与内参照Actin基因相比较得到一个相对拷贝数,用这个相对拷贝数来表示Cyr61mRNA在组织中的起始拷贝数,即用TACT来表示Cyr61mRNA的相对拷贝数,ACT=处理组样本基因CT值一处理组参照基因CT值。Cyr61在肝外胆道系统肿瘤中的表达中位数为3.757(2-△CT×100000),在肝外胆道系统正常组织中的表达中位数为5.240(2-△CTx100000),Cyr61在肝外胆道系统肿瘤中的表达显著高于正常组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：1.Cyr61在肝外胆道系统肿瘤和正常组织中均有表达;2.Cyr61在肝外胆道系统肿瘤中呈高表达；3.Cyr61在胆囊癌和肝外胆管癌中的表达无差异性。