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目的:成人主动脉根部扩张及主动脉瘤的形成是马凡氏综合征最常见的心血管症状及并发症;主动脉血管壁中膜平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)功能障碍是导致病变的关键因素。本研究探讨TGF-β介导马凡氏综合征主动脉VSMCs衰老的机制,为临床上马凡氏综合征主动脉病变的早期干预和治疗提供新的策略和理论基础。方法:分别选取临床上器官捐献供体和行主动脉手术的马凡氏综合征患者主动脉组织,然后分离、培养、鉴定两组主动脉VSMCs。运用H&E染色、SA-β-gal染色、Ki67增殖实验、免疫荧光染色比较两组主动脉组织中膜VSMCs增殖及衰老情况的差异。ELISA检测对比两组细胞培养基中衰老相关分泌表型(senescence-associated secretory phenotype,SASP)IL-6、IL-8、TNF-α、INF-y的浓度。将供体血管平滑肌细胞分为三组,其中两组分别加入TGF-β1(50ng/ml)和TGF-β1+TGF-β1-siRNA干预48 h后检测三组细胞衰老程度的情况,探讨TGF-β诱导主动脉VSMCs衰老的作用。运用DHE染色比较两组主动脉组织中活性氧水平;并运用Mito-Sox染色比较两组血管平滑肌细胞中线粒体活性氧水平的差异。在供体血管平滑肌细胞培养基中分别加入TGF-β1和TGF-β1+Mito-Tempo(活性氧抑制剂),比较线粒体活性氧水平及细胞衰老程度的变化,探讨高浓度TGF-β刺激线粒体活性氧变化对血管平滑肌细胞衰老的影响。将供体血管平滑肌细胞分为四组,其中三组分别加入TGF-β1、TGF-β1+Mito-Tempo 和 TGF-β1+SC-514(NF-κB 抑制剂)干预 48 h,探讨ROS/NF-κB信号通路在血管平滑肌细胞衰老中的作用。结果:马凡氏综合征患者主动脉中膜发生囊性变并出现退化,呈现出主动脉瘤的典型特征。与供体对照组相比,马凡氏综合征患者主动脉组织中衰老相关蛋白p53和p21的表达增加、细胞衰老增多,免疫荧光染色显示主要为主动脉中膜的平滑肌细胞出现衰老。马凡氏综合征患者血管平滑肌细胞与供体对照组相比,形态明显增大和扁平,增殖能力下降,SA-β-gal染色阳性率增高,衰老相关蛋白表达增加,SASP分泌水平升高。马凡氏综合征患者血清及血管平滑肌细胞中TGF-β1水平明显升高,加入TGF-β1可以诱导正常的血管平滑肌细胞衰老,而抑制TGF-β1可减弱VSMCs的衰老:高浓度的TGF-β1可刺激ROS产生并导致NF-κB激活,而ROS/NF-κB信号通路激活诱导VSMCs衰老,促进衰老相关分泌表型释放。结论:马凡氏综合征患者中高表达的TGF-β刺激产生过量的ROS,从而激活NF-κB信号通路,诱导VSMCs衰老,促进衰老相关分泌表型增多。