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我国是世界最大的罗非鱼养殖国,2014年罗非鱼产量达169.85万吨,约占世界罗非鱼总产量的32%。但近年来罗非鱼养殖业受无乳链球菌感染引起的链球菌病危害严重,为了减少损失,避免因乱用和滥用抗生素类药物而引起病原耐药和药物残留等负面影响,本文在研究了温度对无乳链球菌耐药性影响、筛选抗罗非鱼源无乳链球菌中草药提取液,并考察所筛出中草药提取液对罗非鱼链球菌病疗效,为罗非鱼链球菌病的安全高效新药开发奠定基础。温度是罗非鱼链球菌发病的主要环境因子之一,本文以无乳链球菌标准菌株CICC10465和从海南患病罗非鱼分离的4株无乳链球菌为供试菌,采用美国临床和实验室标准协会(National Committee Clinical Laboratory,NCCLS)药敏纸片法测定其25、30和37 ℃培养条件下对21种抗菌药物敏感性。结果表明,在三个培养温度下青霉素类、碳青霉素类和大环内酯类抗菌药对各实验无乳链球菌菌株均有较好的抗菌活性,但在21种供试药物中,除妥布霉素和复方新诺明在所考察的培养温度下对各实验无乳链球菌菌株均无抑菌圈外,其他19种药物对各供试菌株的抑菌活性均受培养温度显著影响。不同供试菌株受培养温度不同对抗菌药的敏感性影响也不同,其中分别在25、30和37 ℃培养条件下供试菌敏感性最强的抗菌药所占比例分别为时43.8%、35.6%和20.6%;而耐药性最强的抗菌药在25℃、30℃和37℃所占的比例分别为37.0%、37.0%和26.0%。为开发安全高效低廉的罗非鱼链球菌病防治新药,本文以无乳链球菌标准菌株CICC10465和从海南患病罗非鱼分离的4株无乳链球菌致病菌株为供试菌株,采用微孔板法结合琼脂扩散法筛选体外具有抗罗非鱼源无乳链球菌活性的中草药,然后将筛出的中草药拌料投喂人工感染无乳链球菌的罗非鱼,考察其对罗非鱼链球菌病的疗效。结果显示,采用微孔板法从81种中草药的醇提液和水提液中筛出抑菌率达10%以上的中草药醇提液9种和水提液25种,琼脂扩散法测定这些提取液对供试菌的抑菌圈直径,其中生药浓度为333mg/ml的黄柏、冬凌草和贯众醇提药液抑菌圈直径分别为13.83～19.4mm、8.99～15.1mm和7.53～9.37mm;生药浓度为150mg/ml的黄柏、绞股蓝、虎杖和石榴皮水提药液抑菌圈直径范围为10.67～15.8mm、6.33～6.54mm(PBSA1502耐药) 、6.26mm (QH726、PBSA1504和PBSA1502耐药)和6.23～7.34mm,说明黄柏对无乳链球菌的体外抑菌效果最好。黄柏醇提液对实验无乳链球菌的MIC值为3.64～9.09mg/ml,按20g/kg的量拌料投喂黄柏醇提液对人工感染无乳链球菌罗非鱼保护率达30.3%。