蜈蚣纤溶酶的提取纯化及其抗血栓研究

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血栓疾病是目前严重危害人类健康的疾病之一,蜈蚣作为中医一味活血化淤的中药,常用于治疗血栓性疾病,但其作用机制尚未有报道。本文首次从蜈蚣体内提取纯化得到一种纤溶酶,并对其抗血栓作用进行了初步的研究。采用离子交换层析和分子筛等制备方法从少棘蜈蚣中纯化到蜈蚣纤溶酶(Scolopendra subspinipes mutilans L.Koch fibrinolytic enzyme,SSFE),用纤维蛋白平板追踪检测纯化过程中的酶活力,PAGE检测纤溶酶的纯度,SDS-PAGE检测分子量,常规方法检测了SSFE急性毒性、溶血性和出血性,进行了SSFE体外溶栓和体内溶栓实验,并检测了凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(AZTT)和凝血酶时间(TT)三个标准化指标,vwf鉴定人微血管内皮细胞(MVEC),MTT法检测SSFE对人微血管内皮细胞的生长影响。结果PAGE显示SSFE为单一组分,具有纤溶活性;证明SSFE无致出血性且无致溶血活性,低、中、高剂量SSFE使小鼠APTT和TT均显著延长,中剂量SSFE对PT有延长作用,而高剂量作用不显著,MTT检测表明SSFE对mvc的生长具有促进作用,24h促进作用比48h明显,最佳作用浓度为15mg/L。结论蜈蚣纤溶酶具有抗血栓作用。
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