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目的研究Ouabain及其受体NKA-α1抗体、NKA-α4抗体对正常人精子运动功能的影响。方法按世界卫生组织标准选取正常精液标本60例,上游法进行优化,其中30例分别与不同浓度(1×10-2 M~1×10-7 M)Ouabain共孵育,采用CASA系统检测精子运动功能的变化,观察指标为a+b级精子百分率、精子活动率、直线速度、鞭打频率、直线性、前向性、摆动性等;另外30例分别与NKA-α1抗体和NKA-α4抗体共孵育,CASA检测精子运动功能的变化,观察指标同上。结果1、Ouabain对精子活动率和a+b级精子百分率的影响呈现出一定的时效性,随着时间的延长有逐渐降低的趋势;较高剂量(1×10-2 M~1×10-5 M)Ouabain与优化后的精子共孵育4h后,精子活动率下降了62.7%~68.4%,与阴性对照组相比差异有显著性(p<0.05), a+b级精子百分率下降了81.5%~85.7%,与阴性对照组相比差异有极显著性(p<0.01),但两参数4个剂量组间变化无统计学意义(p>0.05);较低剂量(1×10-6 M和1×10-7 M)Ouabain与优化后的精子共孵育后,精子活动率及a+b级精子百分率分别下降了27.2±3.7%和24.5±2.9%,与阴性对照组比较差异无显著性(p>0.05);其余精子运动参数包括曲线速度、鞭打频率、侧摆幅度、平均位移角度均未见明显变化。2、①加入Anti-α1和Anti-α4后的精子活动率分别下降了28.1±2.8%和32.9±3.4%,与对照组相比差异均有极显著性(p<0.01);但Anti-α1和Anti-α4两者间的差异无显著性(p>0.05);②加入Anti-α1和Anti-α4后的a+b精子百分率分别下降了38.7±3.8%和53.2±4.4%,与对照组相比差异均有极显著性(p<0.01);与Anti-α1相比,Anti-α4的作用更明显(p<0.01)。③其它运动参数如曲线速度、鞭打频率、侧摆幅度、平均位移角度均未见显著性变化。结论: Ouabain及其受体NKA-α1、NKA-α4多克隆抗体能显著减低体外培养正常人精子的运动能力,主要影响精子活动率和a+b级精子百分率即精子直线运动能力;与NKA-α1抗体相比较,NKA-α4抗体对精子运动能力的影响作用更明显,在精子运动能力的调控中发挥更为主要的作用。目的检测正常男性、轻度及重度弱精子症患者精浆中EO含量,初步探讨EO与弱精子症及病程的相关性。方法按世界卫生组织标准选取60例正常精液标本,另外选取60例轻度弱精子症和60例重度弱精子症精液标本,采用自制的抗Ouabain多克隆抗体,运用竞争性ELISA法检测精浆中EO的水平。结果轻度及重度弱精子症患者精浆中EO水平分别为25.27±1.71μg/L和26.52±1.82μg/L,明显高于正常男性精浆水平19.32±1.45μg/L,差异均具有极显著性(p<0.01);与轻度弱精子症相比较,重度弱精子症患者精浆中EO水平呈继续升高的趋势,但差异无显著性(p>0.05)。结论EO在弱精子症患者精浆中的水平明显升高,且与疾病的病程可能呈现一定的正相关性,结合实验一结果表明,EO可能参与了精子运动能力的调控,EO/NKA可能是弱精子症病理调控的新途径。目的检测EO在正常和弱精子症SD大鼠睾丸中的表达和表达特征,探讨EO和弱精子症的相互调节关系。方法选择正常SD大鼠和弱精子症SD大鼠各10只;制作睾丸石蜡切片,采用自制抗Ouabain多克隆抗体,运用免疫组织化学S-P法检测EO在两组大鼠睾丸中的表达。结果EO表达于正常组、弱精子症组SD大鼠睾丸组织的间质细胞和相对成熟的生精细胞(圆形精子细胞、长形精子细胞等)的胞质和胞膜上;弱精子症组EO的表达明显增强(p<0.01)。结论EO在正常和弱精子症SD大鼠睾丸中表达,表达强度的差别表明EO可能参与了弱精子症的病理调控过程。