论文部分内容阅读
目的：探讨白藜芦醇(RES)与顺铂(DDP)联合应用对肝门部胆管癌细胞系FRH-0201的影响。方法：人肝门部胆管癌细胞株FRH-0201细胞复苏后常规培养于含有10%小牛血清的RPMI 1640培养液中,用0.25%的胰酶消化传代。以FRH-0201细胞为研究对象,设RES单独作用组和DDP单独作用组(药物作用梯度为5、10、20、40、80、160、320umol／L)；联合用药1组(20umol/LRES+上述不同浓度DDP)、联合用药2组(40umol／L RES+上述不同浓度DDP)；空白对照组(与以上各组同步操作,但不接种细胞)；阴性对照组(与以上各组同步操作,但用相同体积的培养基代替药物)。应用MTT比色法和集落形成实验检测RES、DDP对癌细胞增殖的抑制作用,利用中效原理计算出RES、DDP对癌细胞抑制的中效剂量(IC50)；光学显微镜观察RES、DDP处理后癌细胞形态学变化；流式细胞术检测RES、DDP作用后的细胞周期改变及细胞凋亡率；采用SPSS10.0统计软件包进行分析,MTT实验结果t检验及方差分析,流式细胞术采用X2检验。结果：1、RES、DDP单用或联合作用对人肝门部胆管癌细胞FRH-0201均有抑制作用,且呈剂量、时间依赖性,同样浓度下RES对人肝门部胆管癌细胞株FRH-0201的抑制作用要强于DDP；RES、DDP联合应用的细胞抑制率较二者单独作用显著升高(P<0.05)。RES作用于人肝门部胆管癌细胞FRH-020124、48、72 h的IC50分别为55.35、32.84、28.0lumol／L。2、RES、DDP单独或联合作用于人肝门部胆管癌细胞FRH-0201均可诱导细胞凋亡；RES、DDP联合应用的诱导凋亡率较二者单独作用显著升高(P<0.05)。3、RES单独作用于人肝门部胆管癌细胞FRH-0201,可出现G0／G1期阻滞。DDP单独作用于人肝门部胆管癌细胞FRH-0201,可出现S期阻滞。二者可以从不同环节抑制细胞增殖。结论：1、RES、DDP无论单用或合用对人肝门部胆管癌细胞FRH-0201均有抑制作用,在一定范围内两种药物具有协同作用；2、RES能够明显改变的细胞周期分布；3、RES可诱导出现细胞凋亡。