低氧预适应对大鼠移植肝脏肝窦内皮细胞影响的实验研究

来源 :扬州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:havor
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1目的本实验在建立大鼠原位肝移植(orthotopic liver transplantation,OLT)模型的基础上,通过对供肝大鼠术前低氧预适应处理(hypoxic preconditioning, HP),研究移植肝脏术后2h、24h和48h肝窦内皮细胞的结构、功能变化,同时探讨这些病理变化与HP相关的HIF-1a表达的相互关系,研究HP对肝移植大鼠肝脏的影响。2方法2.1清洁级SD大鼠,随机分为3组,模型对照组(A组):不进行低氧处理的原位肝移植组共30例;低氧移植组(B组):供肝大鼠先进行90min的低氧适应,然后于8小时后切除肝脏作为供肝,行原位肝脏移植。C组:正常大鼠。两组肝移植大鼠均采用Kamada的二袖套法,并加技术改进施行大鼠原位肝移植。2.2各组大鼠均在肝移植术后2h、24h和48h处死六只,切取肝中叶作为标本,做肝组织切片在光镜、电镜下观察SEC的显微及其超微结构的变化。SP免疫组织化学法检测HIF-1a的表达。放射免疫法检测血清ET-1及HA的含量。全自动生化分析仪测定肝功能各项指标。3.结果3.1 OLT大鼠手术成功的标准是手术结束后,大鼠即刻苏醒、翻身,并能维持有效的呼吸、心跳。两组有效肝移植大鼠例数各为30对。实验组冷缺血时间控制在(51.1±3.2) min ,无肝期为(20±2.2) min。各组经腹主动脉灌注引起的肝脏热缺血时间可以忽略不计(一般<5秒)。一周存活率B组明显高于A组(P<0.05)。3.2各组肝移植大鼠术后2h,检测显示:A、B两组肝功能各项均未见明显差异,24h B组ALB显著高于A组,TBIL、ALT、AST、ALP均显著低于A组,48h TBIL、AST、ALP均显著低于A组(P<0.05)。3.3两移植组术后光镜观察均有不同程度的细胞水肿甚至死亡,肝板增厚,肝窦狭窄,肝细胞脂肪变性,但B组的改变要轻于A组,A组于24h后肝窦内出现
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