应用EMD进行重建的牙周组织对正畸力的应答及其机理的研究

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近年来,随成人正畸患者的增加,临床中牙根暴露、牙槽骨吸收等牙周组织丧失的病人越来越多。牙周组织是正畸牙移动的基础,关系到矫治后牙列的平衡、功能和美观。因此,如何为此类患者提供一种安全有效的治疗方法,提高矫治质量,已成为正畸医生日趋关注的问题。 常规正畸时,对于健康牙周,适当的机械刺激能改变细胞的形态,促进细胞的增殖分化以及功能的维持,牙周改建可处于动态平衡。对于有牙周组织丧失的患者,目前国内外牙周领域的研究热点是应用釉基质蛋白衍生物(EnamelMatrix DerivafiveENID)进行牙周重建。其在欧洲、美国和日本的临床应用已显示取得了较好的疗效。但是应用EMD进行牙周重建术后能否接受正畸治疗,牙移动过程中其牙周组织的组织改建过程与正常牙周组织有无区别等这些与正畸临床密切相关的问题,目前国内外相关报道非常少。 本实验以国际公认的beagle犬为实验动物,通过建立牙周组织丧失的动物实验模型,首次探索了在应用EMD进行牙周重建术后,模拟正畸临床加力周期,观察不同时间点牙周组织的变化。从组织形态学观察到蛋白、基因表达水平,应用免疫组织化学(1mmunohistochemistry IHC),原位杂交(In situ hibridization ISH)技术等方法比较EMD重建的牙周组织中与骨改建密切相关的因子骨保护素(osteoprotegerin OPG),破骨细胞分化因子(osteoclast differentiation factor ODF/RANKL)及核心结合因子(corebinding factor Cbfal)的分布变化规律与正常的牙周组织有无区别。从骨形成和骨吸收两方面为牙周组织丧失的患者应用EMD进行牙周重建后能否进行正畸牙移动提供初步的实验依据,为重建牙周组织及后续成人正畸机理的系列深入研究奠定基础并且提供一定的研究方向。 结果显示: 1.通过外科手术方法成功建立了牙周组织丧失的实验动物模型。应用 EMDl2周后,根据x线片、组织形态学检查,发现应用EMD组新生 牙槽骨骨量大于对照组。 2.在正畸力作用下,EMD重建的牙周组织形态学变化与正常牙周相比未 见明显的区别。 3.初次加力后的第一周,调控骨形成的关键性因子Cbfal蛋白在实验组 的表达强于手术对照组和非手术对照组。此后不同时间点的表达变化 规律三个组问无明显的区别。实验组、手术对照组和非手术对照组均 在牙周膜成纤维细胞、成骨细胞、成牙骨质细胞、间充质细胞和破骨 细胞内发现Cbfal蛋白的阳性表达。不同的时间点,其分布呈现一定 的空间特异性。 4.初次加力后的第一周,破骨细胞的分化因子RANKL蛋白和mRNA在 实验组的表达低于手术对照组和非手术对照组。此后三个组不同时间 点的表达变化规律无明显的区别。三个组的牙周膜成纤维细胞、成骨 细胞、成牙骨质细胞、骨细胞、间充质细胞和破骨细胞内发现RANKL_ 蛋白和mRNA的阳性信号。具有时间和空间分布的特异性。 5.初次加力后的第一周,破骨细胞抑制因子OPG蛋白和mRNA在实验 组部分骨小梁边缘的骨细胞和成骨细胞有表达,而手术对照组和非手 术对照组未见明显表达。此后三个组的分布变化规律类似。OPG蛋白和mRNA的阳性信号均可在三个组的牙周膜成纤维细胞,成骨细胞, 成牙骨质细胞、骨细胞、间充质细胞和破骨细胞内发现。随时间的变 化,存在一定的空间分布规律。 本研究结论: 1.应用EMD重建的牙周组织新生的牙槽骨的骨量大于对照组。 2.从组织形态学和调控骨改建的关键性因子的变化规律提示应用EMD 重建的牙周组织可以进行正畸牙移动。 3.根据Cbfal蛋白、RANKL蛋白和mRNA、OPG蛋白和mRNA在初次加力后的第一周的表达情况,发现应用EMD重建的牙周组织具有一定的抵抗骨吸收的能力。而在其它的时间段,应用EMD组的骨组织改建活动与非手术对照组和手术对照组未见明显的差别。 4.实验组Cbfal蛋白、RANKL蛋白和mRNA、OPG蛋白和mRNA在破骨细胞的阳性表达,充分证明了牙移动过程中,应用EMD重建牙周组织的破骨细胞也可以产生一定的RANKL和OPG,其骨吸收和骨形成活动同样处于一种动态的平衡,是骨改建活动相互关联、密不可分的两个部分。 5.正畸力作用下,调控骨改建的关键因子Cbfal、RANKL和OPG在实 验组表达变化规律与手术对照组和非手术对照组类似,证明Cbfal、RANKL和OPG在EMD重建牙周组织的成骨和破骨活动中同样发挥了重要的调控作用。 综上所述,EMD作为一种有应用前景的生物制剂,为临床牙周组织丧失而又有正畸治疗要求的病人,提供了一条新的治疗途径。
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