沟叶结缕草组织培养及植株再生的研究

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沟叶结缕草,是一种应用较为广泛的暖季型草坪草,具有叶细、色绿、绿期长、较强的耐旱性、耐盐碱性、耐荫性、对土壤要求不高等优良特性,大量栽培于我国南方地区,用于园林绿化、运动场地及水土保持。但在实践应用中沟叶结缕草存在成坪速度慢、抗寒性差、易感锈病、冬枯等突出缺陷;因而有必要通过遗传育种手段对其加以改良。将传统育种方法和现代生物技术相结合,会大大缩短育种周期。本研究的主要目的是对沟叶结缕草进行组织培养及植株再生的研究,以期为沟叶结缕草的基因工程改良奠定一定的基础。主要研究结果如下:1.试管苗的获得方法,即:剥取1.0~2.0cm长的带芽茎段作为外植体;先使用5g洗沽精加水冲洗,再使用5%次氯酸钠10min灭菌,之后用0.1%升汞10min灭菌;最后按照水平式接种到MS基本培养基上培养。2.IBA、NAA浓度分别在0.5-2.0 mg/L和0.1-0.5 mg/L范围内,均有利于试管苗高度的生长和生根:2,4-D浓度在0.1~1.0mg/L范围内有利于试管苗高度的生长;仅使用6-BA、KT对芽的萌发有明显的促进作用,其中6-BA比KT更易促进芽的萌生,但不利于试管苗高度的生长和生根。3.培养基MS+IBA0.1mg/L+6-BA0.1 mg/L有利于试管苗芽的增殖,试管苗在这种培养基上经过30天培养后,芽数可增殖至9个以上。4.剪取生长茁壮的沟叶结缕草试管苗为外植体,以MS+2,4-D 2.0mg/L+6-BA0.02mg/L为培养基,光周期为16h光照/8h黑暗条件最有利于沟叶结缕草愈伤组织的诱导,诱导率达70%以上。5.以MS+2,4-D1mg/L+6-BA0.01mg/L为继代培养基,25天继代一次;最佳分化培养基为MS培养基,分化率为14%。6.试管苗、再生植株易于生根,移栽后成活率在90%以上。
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