长链非编码RNA-SNHG5在高糖缺氧诱导的视网膜血管内皮细胞中的表达及作用

来源 :青岛大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kingboxing
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:检测增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)患者纤维血管膜及高糖缺氧体外培养的人视网膜血管内皮细胞(HRCECs)中SNHG5的表达;观察SNHG5对HRCECs凋亡和迁移能力的影响。探讨SNHG5对HRCECs的保护作用。方法:1、选取2018年5月至2019年11月期间于青岛大学附属医院西海岸院区眼科行玻璃体切割术的患者30例30眼。分为两组:(1)对照组:18例18眼,特发性黄斑前膜患者;(2)PDR组:12例12眼,PDR患者。采用RT-qPCR法分别检测术中取出的黄斑前膜或纤维血管膜组织中SNHG5的表达量。2、取对数生长期的HRCECs随机分为五组:(1)正常组:HRCECs接种于含5 mM葡萄糖的培养基中,置于37℃、体积分数5%CO2的细胞培养箱内培养;(2)高糖组HRCECs接种于含30 mM葡萄糖的培养基中,置于37℃、体积分数5%CO2的培养箱内培养;(3)高糖缺氧组:HRCECs接种于葡萄糖浓度为30 mM的培养基中,置于37℃、体积分数1%O2、94%N2和5%CO2的细胞培养箱内缺氧培养;(4)高糖缺氧过表达组:利用脂质体将含有SNHG5目的基因的质粒转染进入HRCECs,培养于体积分数1%02及30 mM葡萄糖的培养基中;(5)高糖缺氧空载组:将与高糖缺氧过表达组等量的阴性对照质粒转染进入HRCECs,培养条件与高糖缺氧过表达组相同。采用RT-qPCR法检测细胞中SNHG5的表达量;流式细胞术检测细胞的凋亡百分比;细胞划痕实验和Image J图像分析软件检测并计算细胞相对迁移面积=[(初始无细胞区面积—当前无细胞区面积)/36 h无细胞区面积]× 100%结果:1、组织标本中SNHG5的表达:与对照组相比,PDR组SNHG5的相对表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。2、高糖缺氧HRCECs细胞模型中SNHG5的表达:与正常组比较,高糖组HRCECs中SNHG5的表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05);高糖缺氧组细胞中SNHG5的表达量低于高糖组,差异有统计学意义(P<0.05);与高糖缺氧组比较,高糖缺氧过表达组和高糖缺氧空载组细胞中SNHG5的表达量均增高,差异均有统计学意义(P<0.05);高糖缺氧过表达组细胞中SNHG5的表达量高于高糖缺氧空载组,差异有统计学意义(P<0.05)。3、高糖缺氧HRCECs细胞模型中的细胞凋亡情况:与正常组比较,高糖组细胞的凋亡百分比明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);高糖缺氧组细胞的凋亡百分比高于高糖组,差异有统计学意义(P<0.05);高糖缺氧过表达组细胞的凋亡百分比低于高糖缺氧组和高糖缺氧空载组,差异有统计学意义(P<0.05);高糖缺氧空载组细胞的凋亡百分低于高糖缺氧组,差异无统计学意义(P>0.05)。4、高糖缺氧HRCECs细胞模型中的细胞迁移能力:时间、组别及其交互作用均对HRCECs相对迁移面积有明显影响(F组别=252.93,F 时间=791.36,F时间*组别=169.89,P<0.05)。高糖组HRCECs在培养后第36小时相对迁移面积高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);高糖缺氧组HRCECs在培养后第36小时相对迁移面积高于高糖组,差异有统计学意义(P<0.05);高糖缺氧过表达组HRCECs在培养后第36小时相对迁移面积低于高糖缺氧组和高糖缺氧空载组,差异均有统计学意义(P<0.05);与高糖缺氧组比较,高糖缺氧空载组HRCECs在培养后第36小时相对迁移面积增高,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1、与特发性黄斑前膜患者的黄班前膜相比,PDR患者的纤维血管膜中SNHG5表达降低。2、SNHG5在高糖和缺氧环境下培养的HRCECs中表达下调。3、高糖和缺氧刺激后,HRCECs的凋亡率增加,促进细胞迁移,提示高糖和缺氧刺激可损伤HRCECs的细胞功能。4、SNHG5抑制高糖和缺氧环境下引起的HRCECs凋亡和迁移,发挥对HRCECs的保护作用。
其他文献
目的评价应用平阳霉素局部注射治疗婴幼儿面颈部血管瘤的疗效。方法回顾性分析我科采用平阳霉素注射的方法治疗69例婴幼儿面颈部血管瘤的效果。结果 69例中治愈44例,占63.76%
卡波西肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)又称人类疱疹病毒8型(Human herpesvirus 8,HHV-8)属于γ疱疹病毒亚科猴疱疹病毒属。KSHV是人类重要的D
作为高新技术的基础和先导,新材料应用范围极其广泛,被称为是21世纪最重要和最具发展潜力的领域之一。分子基功能材料,特别是集多种性质于一体的多功能分子材料,更是人们把对
随着社会经济的快速发展,铝和铝合金的一系列优异特性,铝材已广泛应用于各行各业,成为发展国民经济和提高人民物质文化生活水平的重要基础材料。作为铝板带材加工过程的重要一个
对于现代工程项目建筑中施工技术要求高、施工环境较为复杂、作业人员行为无法监控等也正,站在确保施工安全以及减少事故发生的立场上,对建筑行业目前存在的安全问题进行分析
这些年来,国内经济的迅猛发展,水利工程的建设项目逐年增多。对工程的实施同样会产生多种负面影响。分析这些问题造成的根源,与施工管理过程不规范,管理人员自身的责任意识不
癌症是目前世界上最致命的疾病之一,近年来光热治疗(PTT)因具有高效、微创、副作用低等独特优势而吸引了广大研究者的关注。由于恶性肿瘤细胞的独特生长机制,肿瘤形成时的浓度
基因全长 cDNA 克隆是研究基因功能的前提之一.新基因全长 cDNA克隆的方法很多,目前比较可行且应用较多的主要是 cDNA文库筛选.本文主要介绍了近年来比较常用的全长 cDNA文库
目的观察氯吡格雷治疗不稳定型心绞痛的疗效。方法将126例不稳定型心绞痛患者随机均分为两组,常规组患者进行常规心绞痛治疗,氯吡格雷组患者在常规组基础上给予氯吡格雷进行
目的评价快速免疫色谱测试法(ICT)在我省基层门诊诊断疟疾的适用性.方法每一发热病人同时用镜检和ICT两种方法检验,并将ICT检验结果与镜检结果进行比较.结果ICT双虫卡诊断间