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目的 认识E-钙粘蛋白(E-cadherin)及β-环连蛋白(β-catenin)在胃癌演进过程中基因的突变,结合其免疫组化检测了解E-cadherin和β-catenin在基因产物水平异质化表达的改变和意义。 方法 ①以35例新鲜胃癌标本和10例癌旁组织中提取的DNA为模板,聚合酶链式反应(PCR)-单链构象多态性(sSCP)法对E-cadhefin的exon8、9及β-catenin的exon3的基因突变进行筛选,对筛选阳性标本行DNA序列测定。②采用PV-9000两步法对以上相应的石蜡标本进行检测。③对免疫组织化学结果采用SPSS12.0软件统计分析,采用四格表确切概率法检验分析。 结果 ①琼脂糖凝胶电泳显示PCR产物与理论大小相等,为特异的目的条带。②PCR-SSCP银染分析中35例胃癌样品中E-cadherin的exon8的3例样品中出现了异常带,突变阳性检出率为8.6%,exon9未发现异常。β-catenin的exon3的2例样品中出现了异常条带。检测的突变全部位于分化不良型胃癌样品中,6例分化型胃癌和10例癌旁组织中未检出突变。③DNA序列分析证实5例筛选突变阳性样品中4例检出了突变位点。④免疫组化结果:E-cadherin的表达在胃癌病人的肿瘤大小、年龄、性别、肿瘤浸润深度和肿瘤淋巴结转移之间的差别没有统计学意义;但在癌与癌周黏膜(p=0.0004,α<0.001)、肿瘤分化程度(p=0.0027,α<0.05)及Lauren分型(p=0.0005,α<0.001)的差别具有统计学意义。 β-catenin的表达在胃癌病人的肿瘤大小、年龄及性别之间的差别没有统计学意义;但在肿瘤分化程度(p=0.0085,α<0.05)、肿瘤浸润深度(p=0.0085,α<0.05)、肿瘤淋巴结转移(p=0.0064,α<0.05)、癌与癌周黏膜(p=0.0001,α<0.001)及Lauren分型(p=0.0074,α<0.01)的差别具有统计学意义差别。 E-cadherin表达与β-catenin表达为正相关,相关系数为0.686,经确切概率法(p=0.0003,α<0.001)检验具有显著统计学意义。 结论 E-cadhenn是参与胃癌发生、发展的重要基因,并且在决定胃癌向哪种亚型发展中起着重要的作用(弥散型、肠型),尤其是其基因突变的机制。E-cadherin表达与