论文部分内容阅读
目的观察大肠杆菌内毒素(LPS)诱导的急性肺损伤(Acute lung injuryALI)早期,肺组织和血浆中促炎因子白介素-1β(IL-1β)、IL-6和抗炎因子IL-10、可溶性髓细胞触发受体-1(sTREM-1)的时序变化,探讨促炎因子与抗炎因子的比值与炎症反应,以及肺组织损伤的关系。方法健康昆明种小鼠52只,雄性,体重(23±2)g,随机分为7组：对照1hr组(10只)、实验1hr组(10只)、实验4hr组(10只)、实验8hr组(10只)、实验12hr组(4只)、实验24hr组(4只)、实验32hr组(4只)。实验组鼠尾静脉注射5mg/kg的LPS,复制小鼠急性肺损伤的模型,分别于1hr、4hr、8hr、12hr、24hr、32hr提取标本,其中前三组提取血浆和肺组织标本,后三组仅提取肺组织标本。对照组鼠尾静脉注射等量生理盐水,并于造模后1h提取血浆和肺组织标本。所有实验小鼠均在水合氯醛充分麻醉后开胸提取肺组织标本,-80℃冻存,分别用于肺组织匀浆液中细胞因子的ELISA检测,肺组织水肿程度的检测,以及病理HE染色和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen PCNA)的免疫组织化学染色观察。采用摘眼球取血法提取血液标本,经离心后取上清液,-80℃冻存,用于血浆细胞因子的ELISA检测。结果(1)血浆中促炎因子的变化：经鼠尾静脉注射LPS造模后1hr,血液中的1L-1β、IL-6较对照组明显升高,造模4hr后IL-6仍持续升高,IL-1β显著下降,仍高于对照组(P<0.05)；(2)血浆中抗炎因子的变化：经鼠尾静脉注射LPS后1hr,血液中的sTREM-1、 IL-10较对照组均明显升高(P<0.05),造模4hr后,与1hr相比,显著下降,但仍高于对照组(P<0.05)；(3)肺组织匀浆液中促炎因子的变化：造模后1hr,与对照组相比,肺组织中的IL-1β、IL-6均明显升高(P<0.05),造模4hr后,肺组织中促炎因子IL-1β和IL-6的水平仍高于1hr时间组(P<0.05),至造模后8hr,IL-6仍持续升高,IL-1β出现下降,但与4hr时间组比较,差异无统计学意义(P=0.05)；(4)肺组织匀浆液中抗炎因子的变化：LPS造模后1hr, sTREM-1较对照组明显升高(P<0.05),IL-10未检测出,造模4hr之后,sTREM-1缓慢下降,仍高于对照组(P<0.05)；(5)血浆中促炎因子与抗炎因子比值的变化：造模后1hr,血浆中的IL-1β/sTREM-1、 IL-6/sTREM-1、IL-1β/IL-10和IL-6/IL-10的比值均低于正常对照组水平(P<0.05),造模4hr后,IL-1β/sTREM-1、 IL-6/sTREM-1、 IL-1β/IL-10和IL-6/IL-10比值显著高于1hr时间组水平,且持续升高(P<0.05)；(6)肺组织匀浆液中促炎因子与抗炎因子比值的变化：造模后1hr,肺组织中的IL-1β/sTREM-1和IL-6/sTREM-1比值较对照组降低(P<0.05),4hr后,与1hr时间组相比,IL-1β/sTREM-1和IL-6/sTREM-1比值明显升高,而且持续上升(P<0.05)；(7)炎症因子比值的相关性分析：相关性分析显示血浆或肺组织内各促炎因子与抗炎因子的比值之间呈正相关(r>0.8P<0.05),血浆和肺组织中相对应促炎因子与抗炎因子的比值之间呈正相关(r>0.8P<0.05)；(8)肺组织湿干重比值(W/D)以及肺组织匀浆液中总蛋白(TP)含量均持续升高。(9)肺组织病理切片HE染色结果与W/D以及TP的含量变化相对应。肺组织增殖细胞核抗原(PCNA)的免疫组织化学染色结果显示造模后32hr肺组织上皮细胞、间质细胞增生显著,而24hr时间组呈现阴性；(10)血浆中sTREM-1与IL-10呈显著性正相关(r>0.8P<0.05),血浆和肺组织匀浆液中的sTREM-1之间也呈显著正相关(r>0.8P<0.05)。结论(1)LPS诱导的小鼠ALI早期(8hr内),造模后1hr,抗炎因子显著升高,上升幅度高于促炎因子,造模后4hr及以后,抗炎因子显著下降,降低幅度明显高于促炎因子；(2)血浆和肺组织中的促炎因子与抗炎因子的比值呈现相同变化趋势。血浆中促炎/抗炎因子的比值可用于估计肺组织炎症反应状态；(3)肺组织炎症反应较系统反应更剧烈；(4)ALI/ARDS过程中损伤肺组织的增生期可能出现在造模24hr后；(5)sTREM-1具有与IL-10相同的改变,发挥抗炎作用,在肺组织中可能发挥比IL-10更重要的保护性作用。