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目的:腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)是肾脏替代治疗方式之一,腹膜组织长期暴露在非生理性的PD液中会引起腹膜纤维化,导致超滤衰竭,使患者不得不退出PD治疗。在腹膜纤维化程中人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)的上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)被认为是核心环节。因此探究腹膜EMT的机制及缓解其进展的措施,具有重要的临床意义。研究表明,间充质干细胞条件培养液(mesenchymal stem cells conditioned medium,MSC-CM)具有抗炎、抗纤维化、促进细胞增殖等作用。也有研究表明,锌离子具有抗炎、抗氧化和抗纤维化等作用,而PD患者体内存在不同程度的锌缺乏。本研究旨在(一)探究人脐带间充质干细胞条件培养液(human umbilical cord mesenchymal stem cells conditioned medium,h UC-MSC-CM)对高糖(high glucose,HG)诱导HPMCs发生EMT的影响及其机制,为MSCs在PD中的应用提供新的理论依据;(二)探究锌离子对HG诱导HPMCs发生EMT的影响及其机制,为锌离子在PD中的应用提供理论依据。研究方法:第一部分研究中,应用CCK-8分别检测不同浓度葡萄糖(1.5%,2.5%,4.25%)和不同体积分数(5%,7.5%,10%,12.5%,15%)的MSC-CM对HPMCs增殖的影响。根据上述CCK-8实验的结果将HPMCs随机分为三组:(1)对照组;(2)HG组(2.5%葡萄糖);(3)CM组(2.5%葡萄糖+7.5%MSC-CM),均作用48h。光镜下观察HG和MSC-CM对HPMCs形态学变化的影响。应用Western blot检测各组HPMCs中EMT相关蛋白及Wnt/β-catenin通路蛋白的表达情况。第二部分研究中,将HPMCs随机分为四组:(1)对照组;(2)HG组(2.5%葡萄糖);(3)HG+TPEN组(2.5%葡萄糖+1μM TPEN);(4)HG+Zn组(2.5%葡萄糖+10μM Zn SO4),均作用48h。应用ELISA检测各组中TGF-β1蛋白表达情况,应用Western blot检测各组EMT相关蛋白及Smad通路蛋白的表达情况。结果:(一)(1)与对照组相比,HG抑制HPMCs增殖,MSC-CM促进HPMCs增殖。(2)光镜下,HG组HPMCs相比对照组,细胞形态多数呈梭形,而MSC-CM可缓解HG引起的HPMCs形态学改变。(3)与对照组相比,HG下调HPMCs中E-cadherin,上调Vimentin和α-SMA蛋白的表达,而MSC-CM可缓解HG引起的上述蛋白表达变化。(4)与对照组相比,HG上调HPMCs中β-catenin蛋白的表达,而MSC-CM可抑制HG对HPMCs中β-catenin的促进作用。(二)(1)与对照组相比,HG组E-cadherin的蛋白表达减少,Vimentin的蛋白表达增多,HG+TPEN组上述蛋白表达改变更明显。与HG组相比,HG+Zn组E-cadherin的蛋白表达增多,Vimentin的蛋白表达减少;(2)与对照组相比,HG组TGF-β1、p-Smad2/3的蛋白表达增多,p-Smad7的蛋白表达减少,HG+TPEN组上述蛋白表达改变更明显。与HG组相比,HG+Zn组TGF-β1、p-Smad2/3的蛋白表达减少,p-Smad7的蛋白表达增多。结论:(一)h UC-MSC-CM可缓解HG诱导HPMCs的EMT,其机制可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路。(二)锌补充可缓解HG诱导HPMCs的EMT,其机制可能是通过抑制TGF-β/Smad信号通路。