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尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)原产非洲,具有生长快、繁殖周期短、适应性强等特点,现已成为我国主要淡水养殖鱼类之一。在自然状态下罗非鱼容易繁殖,但其人工繁殖相对困难,这是因为与常规养殖鱼类相比,罗非鱼个体间性腺发育非同步性,卵子成熟过程短,难以获得大量成熟卵子进行人工受精。为此,本论文通过设计5组标准剂量的催产激素组合,研究不同催产激素组合注射后血清类固醇激素(促性腺激素释放激素Gn RH、促性腺激素GTH、雌二醇E2、孕酮P)含量变化,筛选出对尼罗罗非鱼血清类固醇激素水平变化影响的最佳催产激素组合;根据筛选出的最佳催产激素组合设计梯度剂量组,检测血清中Gn RH、GTH、E2、P含量及肝脏、卵巢中卵黄蛋白原(Vitellogenin,VTG)含量变化,以及肝脏、卵巢中Vtg m RNA表达水平变化,筛选出最佳的催产剂量;在尼罗罗非鱼繁殖生产期间进行了人工催产验证试验,观察催产后144h内实际含卵雌鱼比例与催产效应时间,并从卵子形态变化方面评价催产效应,主要结果如下:(1)分别设计了5组标准剂量的催产激素组合,分别为:(1)DOM6mg/Kg+LRH-A2 10ug/Kg;(2)DOM 6mg/Kg+Gn RH-A4 8ug/Kg;(3)DOM 6mg/Kg+LRH-A2 10ug/Kg+HCG 2000IU/Kg;(4)DOM 6mg/Kg+LRH-A2 10ug/Kg+HCG 2000IU/Kg+PG 6mg/Kg;(5)DOM 6mg/Kg+LRH-A2 10ug/Kg+HCG 2000IU/Kg+PG 6mg/Kg+Gn RH-A4 8ug/Kg,进一步设计了组合(3)的催产剂量试验,分别为1.0倍、1.5倍、2.0倍标准剂量,检测注射后0h、24h、36h、48h、72h雌性尼罗罗非鱼血清类固醇激素(Gn RH、GTH、E2、P)含量变化。结果表明,激素注射后24 h,血清Gn RH、E2含量升高最为明显,GTH、P含量在注射后36 h达到最大值;组合(3)、(4)、(5)引起的类固醇激素含量变化与组合(1)、(2)间差异显著(P<0.05),而组合(3)、(4)、(5)间差异不显著(P>0.05)。1.5倍剂量组中血清类固醇激素含量变化影响明显大于1.0倍、2.0倍剂量组。尼罗罗非鱼最佳催产激素组合及其剂量为DOM 9mg/Kg+LRH-A2 15ug/Kg+HCG 3000IU/Kg,为罗非鱼人工繁殖试验积累了基础资料。(2)根据筛选出的最佳催产激素组合,进一步验证不同剂量(1.0倍,1.5倍,2.0倍)催产激素组合(6mg/Kg DOM+10ug/Kg LRH-A2+2000IU/Kg HCG)注射后0h、24h、36h、48h、72h尼罗罗非鱼肝脏、卵巢中卵黄蛋白原(VTG)含量、Vtg m RNA表达水平变化。结果显示,实验组肝脏、卵巢中VTG含量、Vtg m RNA表达量均显著大于对照组(P<0.05)。注射后36h,肝脏中VTG含量达到最大值,卵巢中VTG含量于注射后72h达到最大值;1.5倍剂量组显著高于1.0倍、2.0倍剂量组(P<0.05)。注射后36h,肝脏中Vtg m RNA表达水平达到最大值,卵巢中Vtg m RNA表达量48h达到最大值,1.5倍剂量组Vtg m RNA表达量显著高于1.0倍、2.0倍剂量组(P<0.05)。以上表明,催产激素对尼罗罗非鱼卵巢成熟发育产生影响,且1.5倍剂量组的作用效果最为显著。(3)为了进一步验证该催产激素组合的生产效果,在尼罗罗非鱼繁殖生产期间进行了人工催产试验,观察催产后144h内实际含卵雌鱼比例与催产效应时间,并从卵子形态变化方面观察了催产效应。结果显示,水温21-29℃时,催产实验组平均含卵率57.5%,对照组平均含卵率27.5%,实验组的含率比例明显高于对照组;实验组含卵时间集中在72h内,对照组含卵时间比较分散。催产后72h,实验组50%雌鱼卵子发育达到成熟期,对照组仅30%。试验结果为尼罗罗非鱼全人工繁殖生产提供了参考依据。