研究背景：多脏器功能障碍综合征(Multiple organ dysfunction syndrome, MODS)病死率极高,治疗费用巨大,目前尚无有效的防治方法。如何减少MODS发病率或降低MODS死亡率是当前危重病医学所面临的最大挑战。由于本病发病机制复杂,迄今为止,学说众多,目前多数研究认为Toll样受体4(Toll-like receptor4, TLR4)可能是MODS的关键启动因子,并通过TLR4/NF-кp信号转导通路的级联放大效应最终导致MODS的发生。现代中医认为,MODS的始动感染性及非感染性病因类似中医学中的“毒邪”“热邪”。清热解毒类代表方黄连解毒汤防治MODS在以往的研究中表现出了良好的疗效,但其机制尚不明确。黄连解毒汤很有可能对炎症通路及炎症介质进行有效调控,从而起到防治MODS发生和降低其死亡率的作用。目的：1、探讨黄连解毒汤对MODS的疗效及器官保护作用,尤其是对胃肠道的保护作用,为临床应用中药治疗MODS提供依据,分析MODS中医证型研究以便于临床指导。2、探讨MODS可能的发病机制,观察TLR4受体、TNF-α炎症因子表达水平变化,从而进一步了解黄连解毒汤调控TLR4对MODS作用机制。方法：临床研究：本研究所选病例来自2009年9月至2012年3月广州中医药大学第一附属医院重症监护室(ICU)符合入选标准的32例患者,随机分为中西医治疗组和西医治疗组,中西医治疗组给予黄连解毒汤结合西医治疗,西医治疗组给予单纯西医治疗,监测确诊MODS后的患者治疗前24h及治疗后第3天、第5天、第7天的体温(腋温、T)、白细胞总数(WBC)、CRP(C—反应蛋白)、红细胞沉降率(ESR)、APACHEⅢ评分的变化；记录治疗前24h及治疗第5天后的消化道出血、中毒性肠麻痹的发生率。记录MODS患者的好转率、死亡率、入住ICU时间、住院费用、机械通气使用时间、各中医证型的发生率,并进行统计比较。动物实验：用酵母多糖-石蜡混悬液腹腔注射法造成小鼠MODS过度炎症反应模型。实验动物简单随机法分组为空白对照组、模型组、中药组三组,于造模前、造模后24h、48h三个时间点分批处死动物取样。采用荧光定量PCR技术测定肠组织中TLR4mRNA表达量,并测定血浆TNF-α浓度变化,同时采用HE染色法制做肠组织病理切片。结果：临床研究：1、中西医治疗组好转率87.5%,死亡率12.5%,西医治疗组好转50.0%,死亡率50.0%。中西医治疗患者的好转率明显高于西医组(P<0.05),其死亡率低于西医组(P<0.05)。并且,经中西联合治疗后APACHEIII评分有逐渐下降趋势,第5天和第7天两组比较有统计学差异(P<0.05)。2、中西组治疗前的中毒性肠麻痹的发生率为50%,消化道出血的发生率为43.75%,治疗后均为12.5%,西医组治疗前分别为43.75%和37.5%,治疗后分别为37.5%和31.25%。治疗后中西组胃肠道功能障碍的发生率较西医组明显降低,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。显示黄连解毒汤联合西医治疗可有效保护胃肠黏膜屏障,防治胃肠道衰竭的疗效优于单纯西医治疗。3、治疗后中西组的白细胞水平均低于西医组,在第5天和第7天有统计学差异(P<0.05),且中西组的白细胞水平呈逐渐下降趋势,各时点间差异有统计学意义(P<0.01)。治疗后两组体温差异无统计学意义(P>0.05),但中西组治疗后体温均低于西医组,处于正常体温值范围,西医组仍高于正常体温值范围。治疗后中西医组的CRP、 ESR相比于西医组降低,有统计学意义(P<0.05),且同组治疗后较治疗前下降,有统计学意义(P<0.05)。4、两组毒热蕴结证占总例数的58.38%,毒热蕴结证有较高发生率。动物实验：1、小鼠脏器病理：造模前后空白组肠组织均未见损害。模型组与中药组造模前无损害。造模前后空白组肠组织均未见损害。模型组与中药组造模前无损害。造模24h后,模型组出现肠黏膜及黏膜下层充血、水肿及慢性炎细胞浸润,细胞质染色变浅,发生率达65%；中药组小肠黏膜及黏膜下层充血、水肿较轻,发生率达40%,两组间比较有统计学意义(P<0.05)。造模后48小时,模型组小鼠可见小肠黏膜及黏膜下层充血、水肿明显及慢性炎细胞浸润,局部黏膜出血及上皮溶解、脱落,随时间延长可见肠黏膜破坏或萎缩,发生率为75%；中药组以上病变较轻,也可见小肠黏膜及黏膜下层充血、水肿,但程度较轻,且少见肠粘膜破坏或萎缩表现,与24h组变化不明显,发生率为50%,组间比较有统计学意义(P<0.05)。2、小鼠死亡率：造模24小时后模型组死亡率达35.0%,中药组为20.0%,与空白组比较均有显著差异,且中药组与模型组之间比较也有统计学意义,P<0.05。造模后48小时模型组死亡率为10%,中药组为5%,无统计学差异,P>0.05。随着时间的延长,48h中药组与模型组小鼠死亡率较24h有统计学差异,P<0.05。模型组总死亡率高达55.0%,而中药组总死亡率仅45.0%,两组比较有显著差异,P<0.05。3、肠组织TLR4mRNA表达：空白组、模型组TLR4mRNA表达比值表现为随时间进展呈现先下降后升高的趋势,两组无显著差异(P<0.05),中药组随时间进展呈逐渐下降趋势,且造模后48h表达量在48h时为三组中最低,但无显著意义(P>0.05)。采用Pearson相关分析,小鼠造模后肠组织病理损害发生率与肠组织TLR4mRNA表达存在相关性,相关系数为0.85,P<0.05。4、血浆TNF-α浓度：空白组、模型组、中药组三组动物造模前后比较均无显著差异(P>0.05)；采用Pearson相关分析,各组肠组织TLR4mRNA含量与血浆TNF-α浓度变化未见相关性,r=-0.419,P>0.05。结论：临床研究：1、黄连解毒汤可有效增加MODS患者的好转率并降低其死亡率,治疗的效果明显优于单纯西医常规治疗,且通过对APACHEIII评分的比较证实黄连解毒汤可以改善MODS患者转归。2、黄连解毒汤结合西医常规治疗可降低胃肠道功能障碍的发生率,保护胃肠道系统功能,促进受损脏器功能恢复,从而明显降低病死率。3、32例MODS的患者中毒热蕴结证与气滞血瘀证、气虚证、血虚证有较高发生率。说明MODS发病的中医证型以毒热蕴结证为主。表明毒邪由血入脏、蕴结脏腑、脏气虚衰加重脏腑损伤、气机失调、气血紊乱的恶性循环而恶化,可能是中医的“脏衰证”的病机表现。为临床辨证使用中医药防治MODS提供中医理论依据。动物实验：1、黄连解毒汤能降低MODS动物的死亡率,减轻MODS动物的胃肠道的损害程度。黄连解毒汤可能具有降低TLR4表达的作用。2、TLR4表达在MODS中可能表现为随病情进展先下降后升高的趋势,推测TLR4的表达可能存在负反馈调节作用。小鼠肠组织病理损害发生率与肠组织TLR4mRNA表达可能存在相关性。血浆TNF-a浓度变化与MODS病情严重程度及肠组织中TLR4表达可能均不存在直接相关性。