手足口病(Hand foot mouth disease,HFMD)是婴幼儿常见的常见的急性感染性疾病,由多种肠道病毒所引起,尤其以肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)为主。自1959年确定以来,在世界各地多次暴发流行,已引起全世界的普遍关注。本研究针对我国2010年2月～10月不同地区所发生的HFMD进行了研究。　　1、2010年2月～2010年10月期间,从我国重庆,山东和河南三个地区的儿童医院和地方疾控中心收集HFMD患者临床粪便样本872份,采用实时荧光定量RT-PCR(Real-time RT-PCR)法共检出肠道病毒(Enterovirus,EV)阳性830例,其中EV71阳性351例,CA16阳性264例,其他肠道病毒215例。病例信息分析表明,感染人群主要集中在1～5岁以下儿童,其中EV71感染者的平均年龄2.2(±2.137)岁,CA16感染者的平均年龄2.12(±1.456)岁;虽然男女患者比例是1.84:1,但男女患者病毒的检出率并不存在统计学差异;HFMD发病高峰期主要集中在5月～6月,占总病例数的81.67％。临床资料分析表明,重症病例中,EV71的阳性率远远高于CA16阳性率,具有统计学差异;EV71感染所引发的临床症状如发热、咳嗽、出疹特征、出疹部位、呼吸系统疾病、神经系统疾病、循环系统疾病和卡他症状等临床症状高于CA16感染的患者;发热温度、中性粒细胞、白细胞和红细胞浓度的临床检测结果也与所感染的病毒型别有关;对重症病例进行危险因素分析发现,病毒型别与重症存在统计学意义。对351个EV71阳性样本进行VP1全基因扩增,共得到268个VP1全基因,分析发现:268个VP1基因均属于C基因型中的C4亚型;同一地区EV71毒株具有更近的亲缘关系,三个地区流行的VP1基因之间的同源性为93.8%～100%,进化距离0.020～0.023,而这三个地区EV71流行株与C4亚型的进化距离为0.060～0.066,与C1～C5亚型的进化距离为0.111～0.141。　　2、2010年4月～8月共收集合格HFMD患者急性期血清样本368份,用ELISA法对血清中的EV71-IgM和CA16-IgM进行检测,其中EV71检出率是76.63%,CA16检出率是20.92%;结合HFMD患者临床症状将患者分为重症和轻症病例组,结果显示重症和轻症病例分别占总样本数的70.38%和29.61%,与EV71和CA16检出率相一致;重症和轻症病例组中EV71的检出率分别是82.24%和63.30%,重症中EV71的检出率高于轻症,而CA16在两个病例组中的检出率分别是18.53%和26.62%,重症的检出率低于轻症,再次证明EV71是引发HFMD重症的重要病原体,与本研究中病原学的研究结果一致。对患者发病天数进行划分,结果显示随着发病天数的增多,EV71和CA16的检出率都在升高,发病3天以后的患者EV71检出率最高,而CA16的检出率在发病2～3天后开始升高,预计随着病例数的增加,这种趋势会更加明显。　　3、本研究通过液相芯片技术对92例HFMD患者和39例健康对照儿童的血清和脑脊液中的12种细胞因子浓度进行测定发现,病毒性脑炎患者比普通HFMD患者能够产生更强的免疫应答反应;EV71感染的HFMD患者细胞因子的表达水平显著高于CA16感染的HFMD患者;在血清中,相比于感染EV71引发病毒性脑炎的患者,感染CA16的患者所表达的细胞因子水平与同时感染EV71和CA16的患者基本相同,说明感染CA16并不影响细胞因子在血清中的表达水平,但是在脑脊液中IL-6的表达水平受到CA16的影响;对检测结果进行统计分析得出,IL-17A、IL-23、IL-10、IL-4和IFN-γ是HFMD患者病毒性脑炎的危险因素。重症病例中IFN-γ的表达水平相对较高,多因素分析表明IFN-γ的低水平表达与病毒性脑炎发病风险相关,IL-4的高表达会增加病毒性脑炎的危险,但IL-10对病毒性脑炎的发病具有保护性,IL-17A的低表达可能与病毒性脑炎的保护性相关,其机制需要进一步研究。本章研究的数据可以为病毒性脑炎和HFMD患者细胞因子表达水平的差异提供初步证据,而这一研究结果还需要通过大量的前瞻性研究对细胞因子进行更全面的评估。　　本研究的结果可以为我国HFMD的控制和预防提供重要的参考信息,同时这些结果可以通过进一步大样本量和长期的连续性调查研究被证实。