论文部分内容阅读
目的:清络饮是国医大师治疗湿热期痹症的经验方,其治疗机制尚不清楚,本研究采用代谢组学方法,初步探索清络饮治疗湿热期痹症的物质基础及受影响的代谢通路,为进一步研究奠定基础,更好地指导临床用药。方法:收集使用清络饮治疗湿热期痹症的患者治疗前、连续用药1个月、连续用药2个月、连续用药3个月时的血液和尿液,采用非靶标代谢组学的方法检测血清中的代谢物,进行单变量分析与多元变量分析,寻找用药后前后的差异代谢物,并进行代谢通路分析。结果:通过对血液和尿液中代谢物的检测与分析,血清中代谢物在连续给药1个月后有71个代谢物倍数变化(FC)大于2且Student t检验p值小于0.05,但在连续给药两个月后有179个代谢物的FC值大于2且p值小于0.05,在连续给药三个月后有603个代谢物的FC值大于2且p值小于0.05。尿液中代谢物在1个月时有51个代谢物FC大于2且p值小于0.05,但在连续给药两个月后有172个代谢物的FC值大于2且p值小于0.05,在连续给药三个月后有72个代谢物的FC值大于2且p值小于0.05。将初步筛选出的代谢物进行正交偏最小二乘法判别分析,血差异的代谢物主要有氨基甲酰磷酸酯、苯丙氨酸、二酰基甘油、辅酶A、甘油二酯、磷脂酸、磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂、心磷脂、L-乙酰肉碱、胆汁酸、甘氨酸、丝氨酸、同型半胱氨酸、腺嘌呤、磷脂酰甘油等代谢物的含量,尿液中的差异代谢物主要有肌酸、脱氧肌酐、二酰基甘油、L-苯丙氨酸、1,7-二甲基鸟苷、磷酸肌醇二磷酸酯、羟脯氨酰赖氨酸、泛酸、亚油酰辅酶A、黄素单核苷酸、甘油二脂、磷脂酰甘油磷酸酯、鸟嘌呤、赖氨酸、甘油二酯、磷脂酰乙醇胺等代谢物的含量。这些改变主要与脂质代谢、氨基酸代谢、嘌呤代谢、嘧啶代谢以及与氧化还原相关路径等有关。结论:湿热期痹症患者随着连续清络饮治疗,体内代谢发生了显著改变。在连续用药后的不同时间段,患者体内的代谢物改变不全相同,但具有相似的特征。患者血清中主要与氨基酸及脂质的合成原料或代谢产物相关的代谢物发生了改变,尿液中主要与氨基酸、脂质、嘌呤的合成原料或代谢产物相关的代谢物发生了改变。这些代谢物可以在缓解疼痛、能量底物供应和肌肉恢复、肌肉细胞的增殖、蛋白稳态调节、组织对炎症的反应、细胞氧化应激、受伤关节的修复等方面发挥重要作用。通过对发生显著性改变的代谢物进行代谢通路分析,清络饮影响的代谢通路主要与氨基酸、能量、脂质、嘌呤等的合成与代谢有关。脂质的代谢会影响关节损伤后伤口的愈合和关节炎的严重程度,嘌呤相关代谢通路会影响尿酸盐含量,影响相关介质,缓解患者疼痛。氨基酸与能量代谢通路影响了机体氧化应激,增强应激抵抗力和恢复能力等多种机制。