二甲双胍对人肝癌细胞HepG2增殖及REDD1、cyclinD1表达的影响

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目的:探讨二甲双胍作用于人肝癌HepG2细胞后,对人肝癌细胞HepG2增殖以及对REDD1、cyclinD1表达变化的影响。方法:以不同浓度(0.0、2.5、5.0、10.0mmol/L)二甲双胍处理HepG2细胞,即实验按上述不同二甲双胍浓度共分四组。分别用四甲基偶氮唑盐酶反应比色法(MTT)和流式细胞仪检测各组细胞的增殖活性和细胞周期变化。并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中REDD1、cyclinD1基因mRNA的表达量,用蛋白印迹法(western blot)检测细胞中REDD1、cyclinD1基因的蛋白的表达量。结果:二甲双胍作用细胞48小时后,与对照组相比,二甲双胍处理组的HepG2细胞增殖均明显受到抑制(P<0.05);G1期细胞比例与对照组比较均明显增加(P<0.05);RT-PCR检测显示各二甲双胍处理组REDD1mRNA的相对表达量均明显高于对照组(P<0.01),cyclinD1mRNA的相对表达量均明显低于对照组(P<0.05);western-blot检测显示二甲双胍处理组REDD1蛋白相对表达量与对照组比较明显升高(P<0.01),cyclinD1蛋白相对表达量与对照组比较明显下降(P<0.01)。结论:二甲双胍可抑制HepG2细胞的增殖活性,诱导HepG2细胞生长周期阻滞于G1期,并上调HepG2细胞REDD1基因mRNA和蛋白的表达,抑制cyclinD1基因mRNA和蛋白的表达,呈浓度依赖性。
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