【摘 要】
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为了研究Oct-2在Hela S3等上皮来源的肿瘤细胞中是否也有调控免疫球蛋白表达的作用,根据Oct-2 mRNA的序列设计了特异引物,首先用RT-PCR的方法检测在HeLa S3、A549和MCF-7等上
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为了研究Oct-2在Hela S3等上皮来源的肿瘤细胞中是否也有调控免疫球蛋白表达的作用,根据Oct-2 mRNA的序列设计了特异引物,首先用RT-PCR的方法检测在HeLa S3、A549和MCF-7等上皮来源的肿瘤细胞中是否有转录因子Oct-2的表达,结果显示这些细胞中没有Oct-2的表达.进一步又以从Daudi细胞(B细胞性淋巴瘤细胞系)的mRNA中扩增得到的Oct-2 cRNA片断为探针,通过Northern Blot的方法检测Oct-2在HeLa S3、A549和MCF-7等细胞中的表达情况,得出了与RT-PCR一致的结果.这些结果提示:Oct-2可能没有参与HeLa-S3细胞中的免疫球蛋白的表达调控.为了更深入的对这一在肝癌组织中特异性高表达的蛋白进行研究,该文利用凝胶过滤层析和阴离子交换层析的方法从肝癌组织的胞浆粗提蛋白质中纯化该蛋白,等电点分析结果显示为pH为6.0左右;SDS-PAGE将其分离后,将其电转到PVDF膜上,进行N端测序,得到N端15个氨基酸的序列,通过在NCBI数据库中进行比对后,发现与氨基甲酰磷酸合成酶-1(carbamoy1-phosphate synthetase 1, CPs-1)的39-54位的氨基酸完全同源.即该蛋白为不含信号肽的、在肝脏特异表达的CPS-1.
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