【摘 要】
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目的:实验一:通过收集骨肉瘤及癌旁组织临床病理标本,研究piezol在骨肉瘤样本中的表达情况,阐述Piezol与骨肉瘤发病的潜在关联。实验二:通过细胞实验,观察Piezol在姜黄素干预的骨肉瘤细胞系U2-0S中的表达情况,并分析Piezol及姜黄素共同干预对细胞增殖、迁移及细胞凋亡的影响。方法:实验一:收集临床骨肉瘤病理标本,本实验共纳入5例骨肉瘤患者癌组织及对应癌旁组织的石蜡标本;制作石蜡切片进
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目的:实验一:通过收集骨肉瘤及癌旁组织临床病理标本,研究piezol在骨肉瘤样本中的表达情况,阐述Piezol与骨肉瘤发病的潜在关联。实验二:通过细胞实验,观察Piezol在姜黄素干预的骨肉瘤细胞系U2-0S中的表达情况,并分析Piezol及姜黄素共同干预对细胞增殖、迁移及细胞凋亡的影响。方法:实验一:收集临床骨肉瘤病理标本,本实验共纳入5例骨肉瘤患者癌组织及对应癌旁组织的石蜡标本;制作石蜡切片进行免疫组化分析,检测piezol的表达。所有病理标本均来自广州中医药大学第一附属医院。实验二:通过U2-0S细胞系,将细胞以不同浓度姜黄素进行干预,应用转录组测序技术检测姜黄素干预细胞后转录组基因表达情况,应用姜黄素、siRNA分别及共同干预细胞后,Q-PCR、western blot、钙成像检测piezol基因及蛋白表达,划痕实验检测细胞迁移功能,Annexin V/PI染色及流式细胞术检测细胞凋亡及增殖。成果:免疫组化结果示对比癌旁组织,在骨肉瘤组织中piezol基因表达较高;且转录组测序结果示姜黄素干预细胞后piezol基因明显下调,QPCR、western blot及钙成像验证姜黄素对piezol的下调作用及piezol沉默的作用。划痕实验、流式细胞术结果表明姜黄素及沉默piezol后可抑制细胞的迁移和增殖,促进细胞凋亡,当姜黄素及siRNA共同干预细胞后,细胞增殖及迁移能力进一步下降,诱导细胞进一步凋亡。结论:Piezol在骨肉瘤组织中高表达,可能是骨肉瘤诊断、治疗的潜在靶点。另,Piezol蛋白在骨肉瘤细胞系的多种生理活动中起重要作用,Piezol特异性沉默可增加骨肉瘤细胞对姜黄素的敏感性,可进一步抑制骨肉瘤细胞的迁移并促进细胞凋亡,为骨肉瘤的治疗提供的新的思路。
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