尼群地平片为选择性钙离子通道拮抗剂,临床上通常用于治疗高血压,亦可用于冠心病与充血性心衰的治疗。本课题所用的参比制剂是由德国拜耳公司生产的尼群地平片,规格为10 mg/片。目前在国内未上市,且国内亦无通过仿制药生物等效性评价的产品。尼群地平是在生物药剂学分类系统中,属于BCS 2类药物,具有低溶解性和高肠道渗透性的特点,不同的体内外环境下释放性能关联性较差。本课题旨在通过高效的质量评价方法对制剂进行体内外评价,筛选优质的处方和制备工艺。第一部分尼群地平片的制备和处方工艺的研究目的:分析参比药物的处方,并以溶出曲线与参比制剂的相似性为质量评价标准,筛选合适的处方工艺。同时确保尼群地平杂质I的含量不超过限度。方法:1.通过预实验,确定参比制剂的处方的主要原辅料成分,用量和API的粒径。2.采用湿法制粒工艺,制备自制尼群地平片。并通过实验验证参比制剂是否使用了共研磨工艺和固体分散体技术。3.通过溶出度试验,以相似因子f₂为指标,使用响应曲面法筛选和验证最佳处方工艺条件,并考察工艺稳定性。结果:根据处方筛选,确定尼群地平片的最优处方为:工艺参数为:干燥温度60℃,干燥时间4 h。片重82.6 mg,压力15 k N,硬度4⁶ kg/cm2,直径6 mm浅凹冲压片。结论:自制尼群地平片与参比制剂的外观、微观形态相似,溶出曲线相似,自制片的制作工艺简单稳定可靠,三批自制制剂重现性良好。第二部分尼群地平片体外分析方法的建立目的:根据尼群地平的性质和既往研究资料,建立简单,区分力强的体外溶出分析评价方法,且要求具有较好的重现性及体内外相关性。建立合适的有关物质和药物含量分析方法。以确保制剂的质量的可控性。方法:1.体外溶出方法:桨法,100 RPM。溶出介质:37℃,900 ml。四种溶出介质如下:含有0.15%的吐温80的水溶液含有0.15%的吐温80的p H=1.2的盐酸溶液含有0.15%的吐温80的p H=6.8的磷酸盐缓冲液含有0.15%的吐温80的p H=4.0的醋酸盐缓冲液2.体外溶出样品的分析方法:UV-VIS法,λ=358 nm。3.药物含量,有关物质测定方法:HPLC-UV法,检测波长λ=237 nm。结果:1.建立了尼群地平片体外溶出度方法,方法操作简单,对参比制剂与自制制剂具有足够的区分力,可以用于自制尼群地平片的处方筛选。2.建立了尼群地平片体外溶出样品的分析方法。此方法操作简单快速,滤膜吸附性,重现性,线性,精密度溶液稳定性和回收率均良好。可用于快速检测尼群地平片溶出度试验的结果。3.建立了尼群地平片药物含量测定的方法,此方法的系统适用性,专属性,线性,精密度,重复性,重现性,溶液稳定性,耐用性和回收率均良好。可用于分析尼群地平片的药物含量。4.建立了尼群地平片有关物质的测定方法,该方法的系统适用性,专属性,线性,重复性,溶液稳定性和提取回收率均良好且检测限较低。可用于分析尼群地平片的有关物质含量。结论:本试验中建立的尼群地平片体外检测方法操作简单快速可靠,三批自制尼群地平片的药物含量和有关物质均符合药典要求。溶出曲线与参比制剂相似。第三部分尼群地平片稳定性的研究目的:研究自制片剂在不同温湿度和光照影响下,溶出曲线和有关物质随时间变化的规律。为药品的生产,包装,储存等条件提供参考。方法:对自制片进行影响因素试验与加速试验。随后对样品进行体外评价。1.影响因素试验:高温试验:将样品置于40℃和60℃环境下,第5天和第10天取样。高湿试验:将样品置于RH 92.5%和RH 75%环境下,第5天和第10天取样。强光照射试验:将样品置在光照4500 lx环境下,第5天和第10天取样。2.加速试验:在40℃,RH 75%环境下放置6个月,第1,2,3,6个月取样。结果:1.高温环境下,尼群地平片的溶出度,药物含量和有关物质均符合要求。2.高湿环境下,尼群地平片的溶出度有所降低,但是溶出度,药物含量与有关物质均符合要求。3.强光照射环境下,尼群地平片有关物质不符合要求,溶出度与药物含量无明显变化。4.加速试验6个月后,自制尼群地平片的溶出度,药物含量和有关物质均符合要求。结论:自制尼群地平片应当采用避光防潮的包装,并于阴凉通风处保存。第四部分尼群地平片的比格犬体内药物动力学研究目的:建立尼群地平在比格犬血浆中的分析方法并研究尼群地平自制片与参比制剂在比格犬体内的生物等效性。方法:1.从专属性,基质效应,线性,提取回收率和样品稳定性的角度考察比格犬血浆中尼群地平含量的测量方法。2.动物试验采用两制剂双周期交叉设计试验方法。测定并绘制两种制剂的药-时曲线。最后利用DAS软件计算药动学参数并进行生物等效性分析。结果:1.建立了比格犬血浆中尼群地平含量的测量方法,该方法成本低,简单快速,其专属性,基质效应,线性,提取回收率和样品稳定性均良好。2.自制制剂与参比制剂的AUC_0-t分别为（424.64±31.72）和（457.23±80.02）ng/ml*h,AUC_0-∞分别为（457.98±73.81）和（462.01±82.19）ng/ml*h,C_max分别为（161.25±30.47）和（164.56±32.07）ng/ml,T_max分别为（0.71±0.10）和（0.67±0.13）h,t_1/2分别为（2.32±0.36）和（2.62±0.42）。参比制剂与自制制剂中尼群地平的AUC_0-t,AUC_0-∞,和C_max几何均数的比值的90%CI均在80%¹25%以内。ln(AUC_0-t),ln(AUC_0-∞)和ln（Cmax）经双向单侧t检验,t₁≥t_1-α（v）与t₂≥t_1-α（v）同时成立。结论:自制尼群地平片与参比尼群地平片生物等效。