离子液体萃取体系在食品分析分离中的应用

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离子液体作为一种独特的绿色溶剂成为关注的热点。本文将离子液体应用于不同的萃取体系中对不同的食品样品进行分析分离,主要研究内容包括:(1)离子液体双水相萃取分析红酒中的痕量氯酚类物质建立了亲水性离子液体[C4MIM]BF4与无机盐(NH42SO4形成的离子液体双水相萃取富集红酒样品中6种痕量氯酚类物质的方法。通过考察离子液体和盐的种类、pH值、离子液体和盐的加入量对氯酚萃取率和富集倍数的影响,确定了萃取氯酚的最优条件。在最佳萃取条件下,6种氯酚的线性范围为20200μg/L,相关系数(R2)达到0.999,6种氯酚的检出限在3.6812.16μg/L之间。对实际红酒样品进行测定,加标回收率为87.73%103.44%,相对标准偏差在0.33%6.35%之间,检测出1种红酒中含有10.9μg/L的2,4-DCP。该方法简便,对氯酚的富集倍数高、重复性好、样品用量低,在不经过其他前处理的情况下,能够直接对红酒中的氯酚类物质进行萃取富集和分析。(2)离子液体调节的双水相体系逆流色谱分离鸡蛋清溶菌酶建立了离子液体作为传统PEG1000-磷酸钾盐体系的调节剂分离鸡蛋清中溶菌酶的方法。通过研究不同种类、不同量的离子液体添加到经过优化的16%PEG1000-12.5%磷酸钾盐体系中对鸡蛋清三种蛋白质分配系数的影响,最终确定3%[C4MIM]Cl-16%PEG1000-12.5%磷酸钾盐、pH8.0的体系对鸡蛋清样品进行逆流色谱分离。与不添加离子液体的体系相比,该体系溶菌酶的分配系数与卵白蛋白的分配系数发生了颠倒,在逆流色谱分离中较卵白蛋白先出,与所测得的分配系数结果一致。该体系能够得到更多的纯度较高的溶菌酶级分,对鸡蛋清溶菌酶的分离效果有一定的改善和提高。(3)辛巴蓝染料CB修饰的离子液体[C4MIM]3[CB]萃取分离鸡蛋清中的溶菌酶建立了染料CB与[C4MIM]Cl合成的新型离子液体[C4MIM]3CB萃取鸡蛋清中溶菌酶的方法。该方法利用[C4MIM]3[CB]与溶菌酶的特异性结合作用,通过萃取和反萃取两个步骤,能够将溶菌酶与鸡蛋清中主要蛋白质卵白蛋白和卵转铁蛋白分离。研究了影响溶菌酶萃取率的因素,最终确定了最佳的萃取条件,并将其应用于实际鸡蛋清样品。将含有250mg蛋清粉的水溶液5mL与等体积的8mg/m L[C4MIM]3[CB]的[C4MIM]PF6离子液体溶液混合振荡15min,溶菌酶被选择性的萃取到离子液体相中,而其他蛋白质仍留在水相中;之后采用1.5mol/L、pH为7.0的KCl溶液将溶菌酶反萃取到水相中,将所得的蛋白溶液经脱盐、浓缩、冷冻干燥,得到了12.3mg的溶菌酶产品,纯度为97.56%,酶活力为35000U/mg,纯化倍数达到37.39,且与其他蛋白达到完全分离。该方法选择性高、操作简便、快速,为蛋清中溶菌酶的提取分离提供了一条新的、更为高效的途径。
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