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目的:传统中医长于宏观辨证,侧重于对功能的探讨,微观辨证是其薄弱之处,尤其对于物质组织结构特别是在亚细胞水平上的研究尚欠深入。细胞色素氧化酶是线粒体电子传递呼吸链上的标志酶,对氧有高度亲和力,能够使呼吸链以最大速度发挥作用。为了进一步对脾主运化与线粒体结构和功能状态的关系进行观察和评价,我们在“中医脾-线粒体”相关的理论指导下,运用电镜酶组织细胞化学的方法,探讨消化性溃疡中医证型与线粒体细胞色素氧化酶相关性。 方法:选择消化性溃疡病患者脾气虚证、胃热证及正常组各5例,胃镜下取胃粘膜组织,改良的以3,3-二氨基联苯胺四盐酸(DAB-4HCL)为底物的细胞色素氧化酶细胞化学定位方法孵育组织,再用常规电镜制样,不染色,电镜下观察线粒体结构及细胞色素氧化酶分布情况,并运用体视学方法进行图像分析,探讨不同证型细胞化学反应的特征。 结果:正常组在活性部位可看到细胞色素氧化酶反应颗粒沿线粒体内膜和嵴均匀排列;胃热组线粒体丰富,酶阳性物沉积于多数尚完整的线粒体膜和嵴上,少数线粒体膜或嵴破坏;脾气虚组患者壁细胞不仅线粒体数量减少,而且线粒体的结构有明显的损伤,部分线粒体细胞色素氧化酶染色缺失。与正常组比较,脾气虚组患者胃粘膜壁细胞线粒体面积Am、周长Bm减小(P<0.05),线粒体发生固缩,线粒体比膜面δm值也随之减小(P<0.01),酶反应面积Ae的值减小(P<0.01),线粒体细胞色素氧化酶阳性反应密度Rme随之减小(P<0.01),线粒体膜上酶反应不连续,所以酶阳性反应周长Be的值也减小(P<0.01);胃热证组患者线粒体面积Am、阳性反应的线粒体膜长度Be于正常组比较没有显著性意义(P>0.05),酶反应面积Ae的值减小(P<0.01),线粒体上酶反应不连续,酶阳性反应密度Rme减小(P<0.01);脾气虚组Am、Bm、Ae、Be、Rme均低于胃热组(P<0.01)。 结论:消化性溃疡中医不同证型与线粒体细胞色素氧化酶具有相关性。脾气虚组患者线粒体数目减少及细胞色素氧化酶活性降低,导致能量不足,脾主运化失司,引起一系列脾虚证候,这是中医“证”的一个重要超微病理基础。进一步印证了中医脾—线粒体相关理论,从亚细胞水平,较确切的阐明了脾主运化的实质内涵。