靶向HPV18E6基因siRNA对Hela细胞p21、VEGF、Bax和Bcl-2基因的影响

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目的研究针对人乳头瘤病毒18型E6基因的特异性小干扰RNA(siRNA)对人宫颈癌细胞增殖相关基因p21、VEGF、Bax和Bcl-2的影响。方法利用特异性siRNA脂质体法瞬时转染Hela细胞,采用半定量RT-PCR检测Hela细胞中p21、血管内皮生长因子(VEGF)、Bax和Bcl-2mRNA的变化,采用免疫组化的方法检测Hela细胞中p21和VEGF蛋白的变化。结果RT-PCR检测结果显示转染前p21 mRNA的表达水平为0.86±0.02,转染后24、48、72h,其表达水平分别为1.06±0.02、1.66±0.03、1.24±0.01;转染前VEGFmRNA的表达水平为1.62±0.03,转染后24、48、72h,其表达水平分别为1.47±0.06、1.31±0.03、1.35±0.13;转染前BaxmRNA的表达水平为0.94±0.02,转染后24、48、72h,其表达水平分别为1.46±0.03、2.42±0.03、1.37±0.04;转染前Bcl-2mRNA的表达水平为1.57±0.04,转染后24、48、72h,其表达水平分别为1.23±0.02、1.10±0.02、0.89±0.02;转染后各时间点p21,VEGF,Bax和Bcl-2mRNA的表达水平分别与其转染前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。转染后24、48、72hp21和BaxmRNA的表达与转染前比较均有升高;转染后24、48、72hVEGF和Bcl-2mRNA的表达与转染前比较均有降低。免疫组化检测显示转染前p21蛋白的表达水平为0.26±0.02,转染后48、72h,其表达水平分别为0.42±0.03、0.48±0.03;转染前VEGF蛋白的表达水平为0.43±0.02,转染后48、72h,其表达水平分别为0.36±0.02、0.32±0.03;转染后各时间点p21,VEGF蛋白的表达水平分别与其转染前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论HPV18 E6siRNA可特异有效的干扰宫颈癌Hela细胞中E6基因的表达,同时上调p21和Bax基因的表达,降低VEGF和Bcl-2基因的表达,从而抑制细胞增殖。
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