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枣树(Zizyphus jujuba Mill.)是鼠李科枣属植物,是我国重要的生态经济树种。通过花药培养来获得单倍体植株,在植物育种、物种进化、遗传分析、分子生物学研究等方面具有重要的意义。本研究以‘冬枣’花药为试验材料,研究了花蕾不同发育形态与愈伤组织诱导的关系；对花药愈伤组织诱导的影响因素、花药愈伤组织增殖的影响因素和花药愈伤组织分化的影响因素进行研究,以期建立并优化得到一个高效的‘冬枣’花药培养体系。主要研究结果如下：1.‘冬枣’花药培养外植体的选择‘冬枣’花药愈伤组织诱导率与花蕾发育形态相关。当花蕾为黄绿色或淡黄色时,愈伤组织诱导率高；当花蕾为绿色时,愈伤组织诱导率最低。2.‘冬枣’花药愈伤组织诱导体系优化(1)低温预处理没有显著促进‘冬枣’花药愈伤组织的诱导。未经低温预处理的花药产生淡绿色愈伤组织；经过1d或3d低温预处理的‘冬枣’花药产生黄绿色愈伤组织,相比于对照生活力旺盛。(2)甘露醇预处理对‘冬枣’花药愈伤组织诱导率有显著性影响。未经处理的花药愈伤组织小,诱导率低；经过0.4mol/L甘露醇溶液处理花药3d,可使诱导率达到最大。褐化率与出愈率之间没有明显的相关性。(3)‘冬枣’适宜的基本培养基为1／2MS,碳源为30gL的麦芽糖。极差分析显示,2,4-D在‘冬枣’花药诱导培养中具有重要的作用,各激素组合中以1.0mg/L2,4-D+0.5mg/L TDZ的激素组合较适合诱导培养。3.‘冬枣’花药愈伤组织增殖体系优化(1)‘冬枣’愈伤组织增殖的最适培养基为MS+0.3mg/L NAA+1.0mg/L TDZ+30g/L麦芽糖。(2)在培养基中加入10umol/L硝酸银溶液或0.2-0.4gL活性炭能有效的减轻愈伤组织的褐化程度,并提高愈伤组织增殖率。4.‘冬枣’花药愈伤组织分化体系优化愈伤组织在以WPM为基本培养基,添加0.2mg/LNAA+0.5mg/L TDZ+20g/L麦芽糖时,分化率最高89.00%。试验共得到150株‘冬枣’花药培养再生植株。5.花药再生植株倍性鉴定体系建立通过细胞裂解液的筛选、细胞悬浮液的制备、DNA特异性染色等研究、建立了枣树的流式细胞分析流程。流式细胞仪倍性分析和SSR分子标记分析表明,150株花药再生植株均为杂合二倍体。