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铁皮石斛Dendrobium officinale为传统名贵中药,自然资源以尽枯竭,已列入濒危保护植物。对它的种质资源调查有利于有目的的引种人工种植。物理诱变和化学诱变是中药材品种改良的常用方法,对铁皮石斛进行这方面的研究有利于该产业的可持续发展。铁皮石斛种质资源离不开植物组织培养,组培工厂化生产是铁皮石斛种植规模化的基础,如何降低生产成本是维持铁皮石斛产业健康发展的基石。由于铁皮石斛组培周期长,如何有效解决污染问题是降低成本的一个重要方面。 1 8种不同地域铁皮石斛生物学特征及有效成分分析 通过对8种不同地域铁皮石斛的株高、茎粗、叶长、叶宽、叶面积和叶长宽比等生物学特征进行比较,同时测定了上述8种铁皮石斛的含水量、总多糖、可溶性多糖和纤维素含量。 结论:8种铁皮石斛在形态学上有差异;雁荡种铁皮石斛的农艺性状好,有效成分含量高,适合浙江本地栽种。 2 8种不同地域铁皮石斛DNA指纹图谱和DNA2C值分析 通过ISSR—PCR方法进行铁皮石斛种间和种内DNA指纹图谱分析,同时,采用流式细胞检测8种铁皮石斛DNA2C值。结论:引物UBC-846可用于区分种间和种内差异;8种铁皮石斛DNA2C值不同,但是否能用于种内区分和鉴别,还需进一步研究。 3 秋水仙素诱导铁皮石斛四倍体研究 利用秋水仙素不同浓度不同时间组合处理铁皮石斛种胚原球茎,对各种处理产生的效应进行分析,并采用流式细胞仪协同根尖染色体制片进行倍性鉴定。结论:获得四倍体植株。最佳浓度和处理时间为浓度0.05%的秋水仙素处理10天。 4 137铯伽马射线辐照对铁皮石斛种胚原球茎生长和分化效应研究 利用剂量为0、25、50、75、100Gy的137铯伽马射线辐照铁皮石斛种胚原球茎,对半致死剂量LD50,以及生长性状、增殖率和变异率进行测定。结论:LD50约为70Gy。辐射剂量增大,生长受抑制越明显。变异的主要原因是DNA发生改变。 5 铁皮石斛组培工艺优化研究 通过培养容器的创新,引入流水线工艺,发明了多功能框架,采用自然光为培养光源。结论:采用新培养容器和新工艺,生产效率提高3倍以上;能耗降低50倍。 6 异噻唑啉酮对铁皮石斛组培生产中细菌污染的防治作用 通过培养基添加异噻唑啉酮来抑制微生物侵染。结论:低浓度的异噻唑啉酮(50mg·L-1)对于铁皮石斛组织培养中出现的细菌污染有显著的防治效果,对3-3.5cm以上的试管苗的生长发育无任何阻碍作用,反而有一定促进作用。