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第一部分miR-214在胃癌细胞和胃癌组织中的表达及与临床病理特征的关系[目的]检测胃癌组织及胃癌细胞株中miR-214的表达水平以及与胃癌临床病理特征的关系，初步探索miR-214在胃癌进展中的功能作用。[方法]通过实时定量RT-PCR法检测胃癌组织与癌旁组织以及人SGC-7901、BGC-823胃癌细胞株与人正常胃粘膜细胞GES-1中miR-214表达水平的差异，并利用独立样本t检验、Kaplan-Meier生存分析法及Log-rank检验统计分析胃癌组织中miR-214的表达水平与胃癌患者的年龄、性别、胃癌组织分型、临床分期、肿瘤浸润层次、淋巴结转移、远处转移以及临床预后等临床特征之间的关系。[结果]胃癌SGC-7901、BGC-823细胞株中miR-214表达水平相对于GES-1正常胃粘膜细胞的2-△△Ct值分别为（4.20±0.25）（P<0.01）和（3.3±0.24）（P<0.05），两者之间具有显著性差异；胃癌组织中miR-214的表达水平相对于周围正常胃粘膜组织的2-△△Ct值为（4.22±1.45），两者之间具有显著性差异（P<0.01）；胃癌组织中miR-214的表达水平与肿瘤浸润深度有关，浸润深度越深，miR-214表达水平越高，具有显著性差异（P=0.001）；与远处转移有关，有远处转移的标本miR-214表达水平更高，具有统计学差异（P=0.005）；与胃癌的临床分期密切相关，临床分期越晚，miR-214的表达水平越高，并具有显著性差异（P=0.001）；miR-214低表达组患者中位生存时间为2.7年，高表达组中位生存时间为1.4年，两组之间具有显著性差异（P=0.012），风险比（HR）为1.929（95%CI：1.497-2.360）。[结论]miR-214在胃癌组织和细胞中高表达，胃癌组织中miR-214的表达水平与胃癌的浸润深度、远处转移呈正相关，而与患者的临床预后呈负相关。第二部分miR-214对胃癌BGC-823细胞生物学行为及对顺铂耐药性的影响[目的]观察miR-214的异常表达对胃癌BGC-823细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭以及对顺铂耐药性的影响。[方法]利用脂质体转染法将miR-214mimics和inhibitor转入胃癌BGC-823细胞以上调和下调细胞中miR-214的表达水平，采用MTT法和平板细胞克隆形成实验观察胃癌细胞增殖变化，流式细胞仪检测胃癌细胞的细胞周期和凋亡变化，Transwell小室实验观察胃癌细胞的迁移和侵袭变化；并利用MTT法检测转染miR-214前后胃癌细胞对顺铂的半数抑制浓度，以观察胃癌细胞对顺铂耐药性的变化。[结果]转染miR-214mimics组BGC-823细胞的OD值较mimics control组明显升高，各时间点两组之间均具有显著性差异（P<0.05），而转染miR-214inhibitor组BGC-823细胞的OD值较inhibitor control组明显降低，各时间点两组之间均具有显著性差异（P<0.05）；转染miR-214mimics组PI值明显高于mimics control组，两者之间有显著性差异（P=0.04），而转染miR-214inhibitor组PI值明显低于inhibitor control组，两者之间有显著性差异（P=0.02）；转染miR-214mimics组的CFE值明显高于mimics control组，两者之间有显著性差异（P=0.016），转染miR-214inhibitor组CFE值明显低于inhibitorcontrol组，两者之间有显著性差异（P=0.042）；转染miR-214mimics组穿入滤膜细胞数明显多于mimics control组，两者之间有显著性差异（P=0.031），转染miR-214inhibitor组穿入细胞数明显少于mimics control组，两者之间有显著性差异（P=0.041）；转染miR-214mimics组穿入Matrigel基质胶的细胞数明显多于mimics control组，两者之间有显著性差异（P=0.037），转染miR-214inhibitor组穿入细胞数明显少于mimics control组，两者之间有显著性差异（P=0.032）；转染miR-214mimics组胃癌细胞与阴性对照组以及miR-214inhibitor组胃癌细胞与阴性对照组的细胞凋亡无显著性差异（P>0.05）；转染miR-214mimics组和阴性对照组胃癌细胞对顺铂的半数抑制浓度（IC50）分别为16.26mg/L和8.63mg/L，95%CI分别为（11.82，20.14）mg/L和（5.63，11.49）mg/L，两者之间有显著性差异（P<0.05），而转染miR-214inhibitor组和阴性对照组胃癌细胞IC50分别为10.24mg/L和4.83mg/L，95%CI分别为（6.64，13.64）mg/L和（3.28，6.49）mg/L，两者之间具有显著性差异（P<0.05）。[结论]胃癌细胞内miR-214表达水平的上调可促进细胞的增殖、迁移和侵袭能力，并可提高胃癌细胞对顺铂的耐药性，而下调胃癌细胞中miR-214的表达水平可抑制细胞的增殖、迁移和侵袭能力，并可降低胃癌细胞对顺铂的耐药性，但对胃癌细胞凋亡无明显影响。第三部分miR-214靶向调控PTEN基因表达及其功能作用[目的]预测并验证PTEN是miR-214的靶基因，阐述miR-214通过靶向调控PTEN基因的表达来影响BGC-823胃癌细胞的生物学功能。[方法]根据miRNA靶基因数据库来预测和筛选miR-214的靶基因，通过实时定量RT-PCR和Western-blot检测转染前后胃癌细胞内PTEN mRNA和蛋白表达水平的变化，通过将pcDNA-PTEN质粒和miR-214mimics共转染胃癌细胞以观察细胞增殖、迁移、转移和对顺铂耐药性的变化，并通过双荧光素酶报告基因实验进行验证。[结果]通过生物信息学数据库预测PTEN基因是miR-214的潜在靶基因。实时定量RT-PCR检测结果显示转染miR-214mimics与mimics control组胃癌BGC-823细胞中PTEN mRNA表达水平无明显变化，而转染miR-214inhibitor与inhibitor control组胃癌BGC-823细胞中PTEN mRNA表达水平也无明显变化，差异均无统计学意义（P>0.05）。Western Blot法检测结果显示，转染miR-214mimics组胃癌细胞内PTEN蛋白表达水平较mimics control组显著降低，两组差异具有统计学意义（P<0.01）；而转染miR-214inhibitor组胃癌细胞内PTEN蛋白表达水平较inhibitor control组显著增高，两组差异具有统计学意义（P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验结果显示转染PTEN3’-UTR+miR-214mimics重组质粒组荧光素蛋白的表达水平明显降低，而PTEN3’-UTR+miR-214inhibitor重组质粒组荧光素蛋白的表达水平明显升高（P<0.05）。细胞周期及克隆形成率检测结果显示miR-214mimics+pcDNA-PTEN组胃癌细胞PI值（40.97±4.12）%显著低于miR-214mimics+pcDNA组（53.89±4.87）%，两组之间具有显著性差异（P=0.025）；miR-214mimics+pcDNA-PTEN组胃癌细胞CFE值（62.33±5.13）%显著低于miR-214mimics+pcDNA组（47.67±6.43）%，两组之间具有显著性差异（P=0.037）。迁移实验结果显示miR-214mimics+pcDNA-PTEN组穿入滤膜的BGC-823细胞数明显少于miR-214mimics+pcDNA组，分别为（81.00±9.54）/高倍视野和（107.33±11.37）/高倍视野，两者之间有显著性差异（P=0.037）；侵袭实验结果显示miR-214mimics+pcDNA-PTEN组穿入Matrigel基质胶的BGC-823细胞数明显少于miR-214mimics+pcDNA组，分别为（39.00±6.56）/高倍视野和（24.33±5.69）/高倍视野，两者之间有显著性差异（P=0.043）。胃癌细胞顺铂耐药性实验结果显示miR-214mimics+pcDNA-PTEN组与miR-214mimics+pcDNA组顺铂对胃癌细胞的抑制率分别为（22.01±4.55）%和（24.04±5.21）%，两组之间具无显著性差异（P=0.64）。[结论]miR-214是通过在翻译水平上靶向调节PTEN蛋白水平的表达而影响胃癌细胞的增殖、迁移与侵袭，而对胃癌细胞顺铂耐药性的分子机制尚不明确。