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研究背景:血管再狭窄是血管成形术后再狭窄等多种心血管疾病的病理基础,而血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells,VSMCs)的增殖与迁移在血管再狭窄等心血管疾病中起着关键的病理生理作用。血管平滑肌细胞是构成血管壁结构的主要细胞成分,血管平滑肌细胞异常增殖被认为是血管再狭窄等心血管疾病的病理基础。在某些因子刺激下,血管平滑肌细胞能够表现出异常增殖,呈现与肿瘤细胞相似的生物学行为,且二者许多信号转导途径一致。因此,将抗肿瘤药物用于治疗血管增生性疾病可能是一种新的治疗策略正在被大量研究。而苦豆碱(Aloperine),来源于苦豆子(Sophoraalopecuroides L.),具有抗菌、抗炎、抗过敏、抗肿瘤、抗氧化应激等药理作用,而且还对肾脏、神经元、肺血管重构有保护作用,预示了苦豆碱可能作为防治心血管疾病的潜在药物。研究目的:血管再狭窄的病理生理过程中血管平滑肌细胞的异常增殖和迁移起到了关键的作用。而苦豆碱最近已被证实可以抑制肺动脉血管平滑肌细胞的增殖,因此能够抑制肺动脉血管重构,从而改善肺动脉高压。但是,苦豆碱对球囊损伤后的血管平滑肌细胞的增殖及迁移的影响及作用机制尚不明确。因此,产生了对苦豆碱对球囊损伤后的血管平滑肌细胞的增殖及迁移的作用研究的浓厚兴趣,而且有必要阐明其中的作用及机制。研究方法:本研究中应用苏木精/伊红(HE)染色和免疫组织化学染色测定大鼠颈动脉组织的增殖及收缩表型,使用CCK8和EdU染色测定血管平滑肌细胞的增殖水平,蛋白印迹法测定自噬以及增殖、收缩表型相关蛋白的表达水平,通过透射电子显微镜、共聚焦显微镜定位自噬体,应用划痕实验评估苦豆碱对血小板衍生生长因子(PDGF-BB)刺激的血管平滑肌细胞的迁移能力的作用。而且,还使用特异性自噬抑制剂评估苦豆碱对自噬的影响。研究结果:动物实验中,BI+ALO组的颈动脉壁面积比BI组明显降低(P<0.05),表明球囊损伤后予以苦豆碱处理能够减轻血管内膜增生。与BI组相比,BI+ALO组的PCNA蛋白表达减少(P<0.01),证明苦豆碱能够抑制球囊损伤后血管的增殖,SM22α蛋白的表达显著升高(P<0.01),证实苦豆碱可以抑制血管平滑肌细胞表型转换,LC3-Ⅱ蛋白表达明显升高(P<0.05),表明苦豆碱可以上调血管平滑肌细胞的自噬。细胞实验中,与PDGF组比,PDGF+ALO组的EdU结果显示苦豆碱可以抑制血管平滑肌细胞的增殖(P<0.01),PCNA的表达水平降低(P<0.05),进一步验证苦豆碱抑制血管平滑肌细胞的增殖,LC3-Ⅱ蛋白的表达增加(P<0.01),p62蛋白的表达也明显增加(P<0.05),进一步证实苦豆碱可以上调血管平滑肌细胞的自噬,迁移面积百分比明显降低(P<0.05),证实苦豆碱可以抑制血管平滑肌细胞的迁移。而加了 3-MA共同处理后,能够逆转苦豆碱抑制血管平滑肌细胞增殖及迁移的作用,以及诱导自噬的作用。研究结论:我们的研究结果表明,苦豆碱能够改善球囊损伤后血管再狭窄,通过诱导自噬抑制PDGF-BB刺激的血管平滑肌细胞的增殖和迁移。