猪IGFBP7基因遗传变异及其促生长的分子调控机制研究

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gongfangqing
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)是一种既能携带转运IGFs,又能调控IGFs生物活性的重要蛋白。同时,IGFBP7能独立调节细胞生长、分化和发育。已有研究结果表明IGFBP7基因在双肌臀猪肌肉组织RNA池中的表达量高于非双肌臀,说明IGFBJD7基因与猪肌肉生长发育相关。但关于该基因是如何影响猪肌肉生长发育以及其促生长的调控机制目前未见详细报道。本研究对IGFBP7基因遗传特性及其在猪种间背最长肌发育过程中的表达规律进行了分析,同时鉴定了以IGFBP7基因为靶标的microRNAs,以期阐述IGFBP-基因在肌肉生长发育中潜在的分子作用机制和调控机理。本研究首先分析了猪IGFBP7基因的遗传结构特性,序列分析结果显示IGFBP7基因编码区不存在品种间突变,只在内含子1、3、4中检测到了品种间序列变异。我们进而采用荧光定量PCR技术检测了第1、30、90、120、150和180日龄间大白猪和金华猪背最长肌组织中IGFBP7基因、胰岛素样生长因子1和2(IGF1,IGF2)基因mRNA表达变化,定量结果显示IGFBP7.IGF1和IGF2基因表达模式在品种和不同发育阶段存在显著差异。第1、30和180日龄,金华猪IGFBP7mRNA表达量高于大白猪,而第90、120、150日龄,大白猪IGFBP7mRNA表达高于金华猪,且在90日龄达到差异极显著水平(P<0.01)。大白猪IGFBP7mRNA表达量在90日龄时达到最高,且显著高于其它日龄(P<0.05),而金华猪IGFBP7mRNA表达量在1、30和90日龄间差异不显著,但显著高于120、150、和180日龄(P<0.05):IGF1和IGF2基因表达也呈时序性变化,但与IGFBP7基因表达具有不同的发育表达模式。以上结果表明IGFBP7基因表达可能与不同品种猪肌肉生长发育差异有关,且IGFBP7可能通过一种不依赖IGFs的方式来影响肌肉的发育。Western blot分析结果显示90日龄和180日龄IGFBP7蛋白的表达与此阶段mRNA的表达模式不一致,表明猪IGFBP7基因可能存在转录后蛋白水平的调控。通过生物信息学对IGFBP7基因启动子特性分析显示,IGFBP7基因启动子区有多个与肌肉生长发育相关的转录因子的结合位点,如MVoD、YY1等。缺失载体构建和瞬时转染实验结果表明:启动子的-333~+3区段活性最高,在-349--315之间存在至少一个增强子序列,-585--349之间至少存在一个沉默子序列。遗传特性分析结果显示IGFBP7基因ATG上游-687bp处有一个300bp片段的插入,但我们的研究证实300bp片段的插入并没有影响启动子的活性。而同时在启动子区发现的7个SNPs位点,其中5个位点引起了结合的转录因子的改变,这可能对IGFBP7启动子的转录调控具有作用。本研究还分析了猪IGFBP7基因潜在的可变剪接体模式,结果显示猪IGFBP7存在两个可变剪接体,共有三个转录本,其中IGFBP7完整的mRNA序列为主转录本。随后利用microRNA表达谱芯片筛选了90日龄大白猪与金华猪背最长肌组织中差异表达的microRNAs,结果显示:金华猪相对于大白猪有4个microRNAs表达显著上调,16个microRNAs表达显著下调。差异表达microRNAs靶基因预测和双荧光报告系统实验的结果显示ssc-miR-487b和ssc-miR-142-5p的靶基因可能是IGFBP7。ssc-miR-142-5p和ssc-miR-487b的表达在不同猪种不同日龄存在差异,这两个microRNAs可能在转录后水平调控IGFBP7基因的表达。
其他文献
果蝇(Drosophila melanogaster)作为重要的模式动物,其便捷的遗传可操作性、完备的基因组注释以及丰富的突变株种类,为研究果蝇免疫稳态的调控机制提供了极大的便利,也为研究
有的人年老后,在耳垂处从耳朵口向外下方有一条斜行皱纹,可别小看这小小的皱纹,实际上这意味着动脉硬化、心脏缺血。
<正> 看着别人一天天富起来,而自己仍然囊中羞涩,自己又不比别人差,为何就富不起来?其实,成为一个百万富翁并不困难,关键在于您投资理财的思路,看过这篇文章,想必您会有所收
猪传染性胸膜肺炎(Porcine Contagious Pleuropneumonia,PCP)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的猪的一种高度接触传染性呼吸道疾病,给世界各地
目的:探讨超声对子宫腺肌症的诊断价值。方法:对89例经手术和病理证实为子宫腺肌症患者的超声图像进行分析。结果:病理诊断单纯腺肌症50例,合并子宫肌瘤36例,同时合并子宫肌瘤和卵
猪轮状病毒(PoRV)是引起幼龄仔猪发生急性胃肠炎的主要病原,一般通过接触病畜的排泄物后经粪口途径进行传播,呈地方性流行。目前在我国流行范围较广的是A群PoRV,在猪群中流行
猪呼吸系统疾病(Swine respiratory diseases,SRD)严重威胁着养猪业的健康发展,它的致病机理复杂,可以由一种或多种病毒、细菌、寄生虫引起,也可随着环境、营养、应激和猪只
本文围绕数码相机闪光灯的使用技术,对微距拍摄、主体与背景、正确用光、使用技巧进行了探讨,总结出一些经验,为全面提高数码相机闪光灯的使用技术奠定了一定的基础。