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现代肉鸡饲料磷实际利用率较低,磷排泄污染严重。植酸酶可以释放植物性原料中的植酸磷,节约日粮中无机磷的添加量,降低环境中磷的排放量。本论文通过在肉鸡饲料中添加植酸酶和25-OH-D3,降低饲料有效磷水平,研究25-OH-D3、植酸酶和NPP交互作用对肉鸡生产性能和骨骼发育的影响,并通过血清指标分析、代谢试验、磷转运载体基因mRNA表达,来探讨植酸酶和25-OH-D3对钙磷作用的机理。 试验一:研究25-OH-D3、植酸酶和NPP及其交互作用对肉鸡生产性能的影响 将2400羽1日龄健康黄羽肉鸡,随机分成8个处理组,每处理设5个重复,每个重复60只鸡。试验期为42天,分两个阶段进行。1-4组和5-8组采用不同NPP(非植酸磷)水平(比营养需要降低0.1和0.2个百分点)的基础日粮,在基础日粮中分别添加不同水平的植酸酶和25-OH-D3。结果显示:(1)在8个试验组中,试验3组(NPP0.35%、植酸酶600 U/kg、34.5 ug/kg25-0H-D3和4组(NPP0.35%、植酸酶600 U/kg、69 ug/kg25-OH-D3)的平均日增重、日采食量最高,试验5组(NPP为0.25%、34.5 ug/kg25-OH-D3、300 U/kg植酸酶)平均日增重、日采食量和料重比最差。(2)在小鸡阶段,日粮NPP水平对平均日增重、平均日采食量和料肉比有显著影响;植酸酶和25-OH-D3添加水平对肉小鸡平均日增重、平均日采食量和料肉比无显著影响;NPP与植酸酶对平均日增重和平均日采食量有显著交相互作用。饲粮NPP水平降低0.2个百分点,对小鸡阶段平均日增重有显著影响。日粮NPP水平影响生产性能的原因,可能是日粮NPP水平的降低,引起肉鸡采食量下降,进而使体增重下降。(3)在中鸡阶段,8个试验组的平均日增重和料肉比差异不显著。平均日采食量以第3组最高,第5组最低,其他各组间差异不显著。与小鸡阶段相比,中鸡阶段各组日增重和料肉比的差异减小。中鸡阶段0.2%NPP水平,没有明显地降低肉鸡平均日增重,对料肉比影响不大。 试验二:研究25-OH-D3、植酸酶和NPP及其交互作用对肉鸡胫骨发育的影响 在试验一饲养试验进行的第21天和第42天,从每个重复随机抽取2只鸡,进行屠宰试验,摘取胫骨,测定胫骨长度、直径、鲜重、强度、胫骨灰分、Ca、P等指标,研究25-OH-D3、植酸酶和NPP水平及其相互作用对肉鸡胫骨发育的影响。结果显示:(1)在8个试验组中,第3组(NPP水平降低0.1个百分点,600 U/kg植酸酶和34.5 ug/kg25-OH-D3)和第4组(NPP水平降低0.1个百分点,600 U/kg植酸酶和69 ug/kg25-OH-D3)的胫骨长度、重量、强度、骨灰分和骨磷含量明显高于其它各组。(2)日粮NPP水平对21日龄和42日龄肉鸡胫骨长度、重量、强度、骨灰分、骨钙、骨磷含量有显著影响。NPP水平降低0.2个百分点的5-8组胫骨长度、重量、强度、骨灰分、骨钙、骨磷含量显著低于NPP水平降低0.1个百分点的1-4组。(3)植酸酶与25-OH-D3,NPP与植酸酶,NPP、25-OH-D3与植酸酶对胫骨发育的影响存在交互作用。 试验三:研究25-OH-D3、植酸酶和NPP及其交互作用对肉鸡血液生化指标和养分利用率的影响 在试验一饲养试验进行的第42天,从每重复随机抽取2只鸡进行采血,测定血清中钙、磷和碱性磷酸酶含量。另外,于37-41d采用全收粪法进行代谢试验,测灰分、Ca和tP的利用率。结果显示:(1)肉鸡42日龄血钙含量各组间差异不显著(P>0.05),血磷含量以第4组最高;血清碱性磷酸酶含量第5组最高。(2)日粮NPP水平对肉鸡血磷含量和AKP含量有显著影响(P<0.05),日粮植酸酶水平对肉鸡血清磷含量和碱性磷酸酶含量有显著影响,日粮25-OH-D3水平对肉鸡血清钙、磷和AKP含量无显著影响。植酸酶、25-OH-D3和NPPX寸肉鸡血清钙、磷和AKP含量无明显的交互作用。(3)在养分利用率方面,第8组的灰分、钙和磷的利用率最高,第1组的灰分、钙和磷的利用率最低;日粮NPP水平对肉鸡磷的利用率有显著影响;日粮植酸酶水平对肉鸡灰分和磷的利用率有显著影响;日粮25-OH-D3水平对钙的利用率有显著影响(P<0.01);植酸酶、25-OH-D3和NPP对肉鸡灰分、钙和磷的利用率无明显的交互作用。 试验四:研究25-OH-D3、植酸酶和NPP及其交互作用对肉鸡肉品质的影响 在试验一饲养试验进行的第42天,从每重复中随机抽取2只鸡屠宰,取胸肉和腿肉测定肉色、pH和剪切力。结果显示:各组间腿肌肉色L值、a值、b值、pH和剪切力差异不显著(P>0.05)。日粮NPP、植酸酶和25-OH-D3水平对42日龄肉鸡腿肌肉色L、a、b、pH和剪切力值无显著影响。日粮NPP、25-OH-D3与植酸酶对42日龄肉鸡腿肌肉色L、a、b、pH和剪切力无明显的交互作用。 试验五:研究25-OH-D3、植酸酶和NPP不同水平组合对肉鸡NaPi-Ⅱ b mRNA表达的影响 在试验一饲养试验进行的第21天,从每个重复中随机抽取2只鸡屠宰,取十二指肠、空肠、回肠,采用Realtime PCR对NaPi-Ⅱb mRNA表达丰度进行测定。结果表明:21d肉鸡十二指肠NaPi-Ⅱb mRNA相对表达量显著高于空肠,空肠表达量显著高于回肠。低磷饲粮可以提高21d肉鸡十二指肠、空肠和回肠NaPi-Ⅱb mRNA表达量。 本论文综合结果表明,日粮NPP、植酸酶和25-OH-D3不同水平组合对生产性能、钙磷利用率和骨骼发育有显著影响。NPP、25-OH-D3与植酸酶对胫骨发育的影响存在交互作用。在本试验的8个低磷组中,以NPP水平降低0.1个百分点,添加600 U/kg植酸酶和25-OH-D3(34.5或69 ug/kg)的第3组和第4组的生产性能和骨骼发育较好。21d肉鸡十二二指肠NaPi-Ⅱb mRNA相对表达量显著高于空肠,空肠表达量显著高于回肠。低磷饲粮可以提高21d肉鸡十二指肠、空肠和回肠NaPi-Ⅱb mRNA表达量。