药刮法对兔KOA模型软骨细胞增殖及TRPV6、Sox9表达的影响

来源 :湖南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:peng23
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目的:观察铁包金按摩膏药刮法干预的兔KOA软骨细胞增殖及细胞表达TRPV6、Sox9的情况,探讨铁包金按摩膏药刮法对KOA软骨细胞增殖及TRPV6、Sox9表达的影响。为研究KOA的发病机制以及中药外用的作用机理提供实验依据。方法:通过随机数表法对40只新西兰兔进行分组,分为(A)空白组、(B)模型组、(C)刮法组、(D)铁包金按摩膏组、(E)铁包金按摩膏+刮法组。空白组不予任何干预,其余四组采用木瓜蛋白酶关节腔注射术制备兔模型成功后,采用对应的干预手段,20天后于耳缘静脉空气栓塞处死动物,采用酶消化培养法分离培养兔膝关节软骨细胞,应用甲苯胺蓝染色鉴定软骨细胞,Western-Blot法检测TRPV6、COL-Ⅰ、COL-Ⅱ、Sox9、COL-Ⅹ表达量,CCK-8法检测软骨细胞增殖。结果:在TRPV6、COL-Ⅰ、COL-Ⅱ三种蛋白表达上,空白组与模型组比较,差异具有显著统计学意义(P<0.01);刮法组、铁包金按摩膏组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);铁包金按摩膏+刮法组与模型组比较,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。在Sox9、COL-Ⅹ蛋白表达上,空白组与模型组比较,差异具有显著统计学意义(P<0.01);刮法组、铁包金按摩膏组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);铁包金按摩膏+刮法组与模型组比较,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。采用CCK-8法检测细胞增殖,在0d时间点时,模型组、刮法组、铁包金按摩膏组、铁包金按摩膏+刮法组,这四组组间相互比较,差异无统计学意义(P>0.05),而与空白组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。在3d、7d、10d时间点时,刮法组、铁包金按摩膏组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),铁包金按摩膏+刮法组与模型组比较,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。结论:铁包金按摩膏结合刮法能够通过促进KOA软骨细胞增殖、上调TRPV6、Sox9的表达水平,延缓KOA关节软骨的退变。
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