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背景肺癌是目前我国发病率最高的恶性肿瘤之一,且有逐年增高的趋势,死亡率亦居于所有肿瘤首位,其远处转移为导致肺癌病人死亡的主要原因。目前对于肺癌治疗仍以手术治疗为主,但术后的高复发率及高转移率提示可能在肺癌病人手术前已发生微转移。血液循环系统为肿瘤远处转移的主要途径之一,存在于外周血液中的循环肿瘤细胞(CTCs)在肺癌的复发、转移中有重要作用。循环肿瘤细胞(CTCs)有望成为肺癌患者治疗监测以及预后评估的重要指标。目的研究非小细胞肺癌外周血中循环肿瘤细胞(CTCs)、肿瘤标志物(TM)与非小细胞肺癌临床病理特征的相关性以及循环肿瘤细胞与肿瘤标志物表达的相关性。研究对象以滨州医学院附属医院胸外科2015年6月份至2016年2月份收治的60例非小细胞肺癌患者为研究对象,将同时间段就诊的10例肺部良性病变患者及10例健康志愿者设立为对照组。入组患者肝肾功能均无异常,且入院前均未接受任何治疗。实验方法采取10ml外周静脉血,利用CanpatrolTMCTC二代检测技术(纳米过滤+RNA原位杂交原理)检测静脉血标本中CTCs表达;利用MAGLUMI2000全自动化学发光测定仪和罗氏cobas e601全自动化学分析仪检测肺癌患者血清肿瘤标志物CEA、NSE、Cyfra21-1、SCCAg的表达水平;并使用SPSS17.0对收集数据进行统计学分析。分别对CTCs、肿瘤标志物表达水平与肿瘤的TNM分期、肿瘤浸润程度、是否有淋巴结转移及远处转移的相关性进行研究分析。同时对CTCs与肿瘤标志物的表达相关性进行研究分析。结果1.非小细胞肺癌组中CTCs计数水平明显高于肺良性疾病组及健康志愿者组;其计数水平与患者年龄、吸烟史及肿瘤家族史均无统计学意义(P>0. 05)。2.非小细胞肺癌组Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期患者CTCs总检出率分别为33. 33%(2/6)、44.44% (4/9)、72. 22% (13/18)、88.89% (24/27),差异具有统计学意义(χ2=l1. 573, P=0. 009); M1期患者 CTCs 检测率高于 M0组患者(88. 89%>57. 58%),两组差异具有统计学意义(χ2=7. 171,P=0.007)。3.在非小细胞肺癌组中肿瘤标志物表达的中位数(四分位数间距)分别为CEA;5.46ng/ml (22. 82ng/ml)、 NSE: 16. 79ng/ml (9. 32ng/ml)、 CYFRA21-1:5. 41 ng/ml(7.24ng/ml)、SCCAg:1.92ng/ml (2.26ng/ml),与肺良性疾病组及健康志愿者组差异具有统计学意义(P<0. 01)。4. CEA在腺癌中表达水平偏高,表达水平在T分期、M分期、TNM分期有统计学意义;CY21-1在鳞癌中表达水平偏高,表达水平在M分期、TNM分期中有统计学意义;SCCAg在鳞癌中表达水平偏高,表达水平与T、N、M以及TNM分期无关;NSE在腺癌、鳞癌中表达水平无统计学意义,在N、M及TNM分期中有统计学意义。5. CYFRA21-1≥5. 6ng/ml 组,CTCs 检测率明显高于 CYFRA21 -1<5. 6ng/ml 组,两者差异具有统计学差异;SCCAg仅在肺鳞癌中与CTCs表达相关联。结论1.本研究采用免疫磁珠及膜过滤法对循环肿瘤细胞(CTCs)进行富集,并应用多重双色RNA原位杂交技术检测循环肿瘤细胞(CTCs),证实该方法具有较高的灵敏性及特异性,并且具有广阔的临床应用前景。2.循环肿瘤细胞(CTCs)检测水平与非小细胞肺癌患者年龄、吸烟史、家族史无相关性;与非小细胞肺癌的TNM分期密切相关,分期越晚,CTCs计数越高;伴有肿瘤远处转移患者CTCs检测阳性率将明显增高。3.非小细胞肺癌患者肿瘤标志物检测,在患者早期诊断及临床分期中具有重要意义;其中,CEA在腺癌中表达水平偏高,CY21-1、SCC在鳞癌中表达水平偏高。4. CTCs与Cyfra21-1表达具有相关性;而SCCAg仅在肺鳞癌中与CTCs表达相关联。