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本文以窄头橐吾(Ligulariastenocephala)无菌苗叶片为外植体,研究了植物生长调节剂,外植体和基本培养基对其愈伤组织诱导、不定芽分化、生根培养的影响,以及炼苗时间和移栽基质对植株驯化移栽的影响,筛选出各阶段最佳培养基,建立了窄头橐吾离体培养再生体系。探索了碳源、植物生长调节剂,光照条件对其试管开花的影响。
主要研究结果如下:
1窄头橐吾再生体系的建立。结果表明:愈伤组织诱导最佳培养基为:MS+0.05mg·L-1TDZ+0.5mg·L-1NAA,出愈率为93.33%。诱导愈伤组织的最佳叶片是未完全展开叶,且叶片尖部出愈率较高,光照条件有利于愈伤组织的诱导。最佳分化培养基是:MS+1.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA,分化率最高,为88.33%,可诱导出大量不定芽,培养基MS+1.0mg·L16-BA愈伤组织分化效果较好,分化率为86.67%。生根培养基以1/3MS+0.5mg·L-1NAA最佳,生根率为100.00%,平均根数为9.57条,平均根长为2.59cm,1/2MS+0.5mg·L-1NAA诱导生根的效果较好。培养基中的蔗糖具有壮苗作用,以30g·L-1为宜。移栽前开瓶炼苗时间以5d最佳,移栽基质以珍珠岩、蛭石和泥炭体积比为1∶1∶1成活率最高,为93.33%。
2窄头橐吾试管开花机制的探索。碳源种类对窄头橐吾试管开花起着重要作用,蔗糖和白砂糖诱导花芽分化的效果较好,是较适合的碳源,蔗糖30g·L-1时,花芽诱导率最高。不同细胞分裂素种类及浓度对窄头橐吾试管开花有显著影响,KT1.0mg·L-1时,花芽诱导率最高,为53.33%。不同生长素种类及浓度对窄头橐吾试管开花影响差异不显著,IAA较其他种类有利于花芽分化。CCC对窄头橐吾试管开花的影响差异不显著,浓度为0.6mg·L-1时较适合诱导花芽分化。每天光照10h有利于窄头橐吾试管开花。