论文部分内容阅读
目的:通过对离体人慢性髓细胞性白血病急变期细胞K562细胞系进行单次不同剂量的照射,比较其在不同时间对细胞造成的损伤方式以及细胞对损伤的修复机制和效果,得出辐射对K562细胞的剂量.效应关系和时间-效应关系,并对临床应用射波刀治疗白血病髓外结节病灶进行初步验证和疗效观察。方法:取对数生长期K562细胞分别给予0Gy、1Gy、2Gy、3Gy、5Gy、10Gy、15Gy、20Gy6MV-X线照射,并于照射后2小时、24小时、48小时收集细胞,采用ANNEXIN-V/PI双染色法流式细胞仪检测细胞凋亡百分率变化,PI单染色法流式细胞仪检测细胞周期阻滞情况,并采用MTT比色法和克隆形成法检测照射后细胞的生长抑制和活性,综合以上几种方法检测结果并以SPSS12.0进行统计分析,得出不同照射剂量和时间对离体白血病细胞的杀伤作用方式,以及细胞对损伤进行修复的能力,最后通过对临床病例疗效分析对所获实验室研究结果进行初步验证。结果:1、根据实验结果可将辐射剂量大致分为三个区间组进行比较,分别是低剂量组(1～2Gy)、中等剂量组(3～5Gy)和高剂量组(10～20Gy);2、低剂量组细胞照射后2小时即出现凋亡,且凋亡率随剂量增加而增加(p＜0.05),凋亡峰出现在照射后24小时,此时出现短暂的S期阻滞,48小时后凋亡率减少,但没有统计学意义,细胞周期逐渐恢复,细胞生长无明显抑制,2周后检测克隆形成能力强(85%～93%);3、中剂量组细胞照射后2小时即出现细胞周期S期阻滞,24小时进入G2/M期阻滞,48小时后部分恢复细胞增殖周期,期间细胞凋亡率没有明显变化(p＞0.05),随剂量增加凋亡率没有统计学差异但总凋亡率高于低剂量组(p＜0.05),72小时后细胞生长抑制率增加,2周后克隆形成率低(49%～71%),p值均小于0.05;4、高剂量组细胞照射后2小时出现短暂的S期阻滞后进入持续的G2/M期阻滞,同时细胞凋亡率随时间延长逐渐增加(p＜0.05),但各剂量点间同一时间点凋亡率无明显差别(p＞0.05),总凋亡率高于中、低剂量组(p＜0.05),72小时后细胞生长明显被抑制(p＜0.01),2周后检测很少或无克隆形成(0～23%);5、临床应用射波刀治疗白血病髓外结节6～17Gy/1～3f照射后病灶局部控制率达到100%,耐受良好,无明确治疗相关副作用发生,但受病例数较少和随访时间不足所限尚未能获得统计学检验结果。结论:1、K562细胞经1～2GyX线照射后发生亚致死性损伤,单次照射后48小时后可基本恢复,损伤随剂量增加而增加。2、3～5Gyx线照射后发生部分致死性损伤,经48小时不能完全恢复,损伤随剂量增加而增加。3、10～20GyX线照射后细胞损伤几乎全部是致死性的,经48小时不能恢复,细胞损伤随剂量增加不再继续增加。4、初步认为PET-CT或MRI扫描定位下的射波刀治疗白血病髓外结节病灶安全有效。