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微生物饲料添加剂是新型绿色添加剂,以其天然、无污染、无毒副作用等特点备受人们青睐,它弥补了抗生素带来的不足,又发挥着活性菌剂特有的作用。因此将益生菌作为饲料添加剂对畜牧业的发展及提高畜牧业经济效益有着重要的现实意义。本实验从养鸡场附近的土壤出发,以筛选能够产生蛋白酶、糖化酶和纤维素酶的菌株为目的,通过均匀设计试验,利用DPS数据处理软件得到了优化培养基配方,并且在优化培养基的基础上对混合菌培养条件进行优化,最后对混合培养产酶能力进行了比较。从养鸡场附近土壤中筛选得到既能产蛋白酶,又能产糖化酶和纤维素酶的菌7株,其中产酶能力较高的菌株为5株,分别为X4、X5、X7、F1、F4。复筛实验结果表明X4、X5、F4都能够耐受6%的NaCl,并且不产硫化氢、过氧化氢等有害物质,且能够抑制大肠杆菌；X7在30℃培养24h后出现黏性物质,F1在30℃培养24h后产生过氧化氢。最终确定X4、X5、F4为所筛菌株,将这3种菌以不同比例混合培养,以菌密度OD650值为指标,得到X4:X5:F4的复配比例为2：1：1。本实验采用均匀设计法以最少的实验次数对混合菌生长的培养基进行优化,以培养18h菌密度为指标,用DPS数据处理软件对培养结果进行线性回归分析,获得优化培养基配方为葡萄糖20g/L,蛋白胨22g/L,牛肉膏23g/L,可溶性淀粉13g/L。混合菌在优化培养基下30℃培养.18h后,用平板计数法计算有效活菌数可达到1.06×108cfu/mL。对混合培养条件(培养时间、初始pH值、培养温度、接种量)先进行单因素条件优化,再根据单因素优化的结果,采用正交试验L9(34)对培养条件进行优化,结果表明,在接种量为3%,初始pH7.5的条件下,35℃培养12h菌体生长良好。在优化培养条件下,有效活菌数可达到1.58×109cfu/mL,相比没优化之前提高了14.9倍。以酶活力为指标,对混合菌在不同发酵温度,不同初始pH,不同发酵时间条件下发酵酶活力的变化规律进行了比较。结果表明：蛋白酶、糖化酶和纤维素酶酶活力均能随发酵温度和发酵时间的增加而升高,但糖化酶在发酵60h酶活力下降；蛋白酶在初始pH8时酶活力较高,糖化酶活力随着初始pH增加而降低,纤维素在初始pH7.5时较高。