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研究目的:胃癌(GC)是全球第五大常见恶性肿瘤,也是第三大癌症死亡原因。2012年,胃癌在中国造成32万多人的死亡,约占全球胃癌死亡人数的45%,这表明胃癌仍是中国人口癌症负担的主要原因之一。近年来胃癌的诊断和治疗技术有了很大的提高,但由于局部复发和远处转移等问题,胃癌的五年生存率仍然很低。因此,明确胃癌转移分子机制是胃癌治疗中重要且迫切需要解决的问题。叉头框K1(FOXK1)属于FOX家族,是有助于癌症发展的转录因子,与多种恶性肿瘤的发生发展有关。目前,关于卵巢癌,结肠直肠癌和胶质母细胞瘤中FOXK1的报道已有初步报道。但尚不清楚FOXK1如何调节胃癌细胞的增殖和迁移。自噬是一种高度进化且保守的机制,它在癌细胞中的作用存在争议,似乎其作用取决于肿瘤的类型、所处阶段以及自噬诱导的刺激强度。人们对FOXK1与自噬之间的分子机理和确切功能了解甚少。因此本次研究的目的是调查FOXK1在GC中的临床意义和生物学功能,探讨FOXK1与自噬相关的分子机制。研究方法:首先,利用生物信息学验证FOXK1表达,分析GC患者的总生存期(OS)与FOXK1表达之间的相关性。收集青岛大学附属医院术后病理诊断明确的43例胃癌患者的冰冻组织及癌旁组织。包埋固定为组织微列阵,采用免疫组化染色检测FOXK1在胃癌组织和癌旁组织的表达水平。采用卡方分析FOXK1与患者性别、年龄、胃部肿瘤位置、HER2的表达、病理分化、微血管肿瘤性血栓、淋巴结转移、TNM分期、包膜浸润等病理特征的相关性。接下来,Western blotting和q-PCR技术来验证FOXK1在胃癌细胞的表达及转染效率。采用EdU方法分析FOXK1对胃癌细胞增殖的影响。细胞划痕及Transwell实验验证过表达和低表达FOXK1后胃癌细胞系的侵袭和迁移能力。Westernblotting、免疫荧光、电镜下观察FOXK1与自噬之间的关联。除此之外,通过KEGG通路信号分析及Western blotting发现FOXK1与磷酸肌醇3激酶(PI3K)/AKT/雷帕霉素哺乳动物靶标(mTOR)信号通路之间的关系。最后,体内实验验证敲低FOXK1对小鼠皮下注射成瘤生长的影响。结论及意义:胃癌组织中FOXK1表达水平异常升高且FOXK1表达越高总生存率越低。高水平的FOXK1与病理分化、微血管瘤栓、淋巴结转移、TNM分期和包膜浸润等特征呈正相关,而与性别、年龄、肿瘤位置或肿瘤中的HER2表达无关。进一步发现,FOXK1通过激活Ⅰ类磷酸肌醇3激酶(PI3K)/AKT/雷帕霉素哺乳动物靶标(mTOR)通路并抑制Ⅲ类PI3K的表达来抑制自噬,从而促进GC的增殖、侵袭和转移。除此之外,体内实验也证实了 FOXK1具有促肿瘤的作用。总之,我们的结果表明FOXK1可用作胃癌患者的独立预后指标。我们还通过验证FOXK1与GC恶性行为之间的关系,为GC的治疗提供了新的靶标。