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目的本课题通过动物实验,应用静脉留置针模拟临床输液,检测受损血管内皮细胞凋亡情况,研究血管内皮细胞凋亡与静脉损伤之间的关系,探索留置针致血管损伤的机制,为临床静脉留置针的应用和并发症的防治提供理论依据。方法选择兔耳缘静脉作为实验血管,研究分二步。第一步:建立静脉炎模型选新西兰大耳兔20只,右耳外缘静脉不采取措施,作为对照血管。左耳外缘静脉留置针穿刺置管,作为实验血管,静脉注射生理盐水20ml,1次/d,用药后肝素盐水封管。留置168 h拔管,腹腔麻醉后活体取材,Bouin’s固定液固定24h,常规脱水,石蜡包埋,连续切片(实验血管从穿刺点向近心端方向切片)。两组血管均用HE染色法定性检测和TUNEL法半定量检测血管内皮细胞凋亡情况。第二步:分组实验选取30只健康新西兰大耳白兔,随机分为6组,每组5只,双侧耳缘静脉作为实验血管,留置针穿刺固定,静脉注射生理盐水20ml,1次/d,用药后肝素盐水封管。分别于用药48h,72h,96h,120h,144h,168h拔管后腹腔麻醉切取活体标本。取材方法:以穿刺血管为中线两侧各宽0.1cm,以穿刺点为标记远心端0.5cm、近心端2.5cm共长约3.0cm的矩型标本,截取穿刺点处两端各0.5cm、留置针套管末端处两端各0.5cm的两段标本,分别放入Bouin’s固定液中固定24h。常规脱水透明,石蜡包埋。从穿刺点、静脉留置针套管末端向近心端方向每段标本切片4张,每段第1、3张切片作HE染色定性检测,第2、4张切片作TUNEL法半定量检测,观察血管内皮细胞凋亡情况。结果1.留置168h导致血管损伤后与正常血管比较内皮细胞凋亡阳性率及凋亡程度差异性有统计学意义(**P<0.01)。2.同一留置时间、不同切片部位内皮细胞凋亡阳性率及凋亡程度不同。穿刺点与静脉留置针套管末端处血管内皮细胞凋亡阳性率及凋亡程度差异有统计学意义(*P<0.05)。3.同一切片部位,不同留置时间内皮细胞凋亡阳性率及凋亡程度不同。随着留置时间的延长,血管内皮细胞凋亡程度逐渐加重,各组间细胞凋亡阳性率及凋亡程度差异有统计学意义(**P<0.01)。结论1.静脉留置针机械性刺激可诱导血管内皮细胞凋亡,加重血管损伤。2.血管内皮细胞凋亡程度与静脉留置针的机械性刺激程度有关,静脉留置针穿刺点处血管内皮细胞凋亡阳性率及凋亡严重程度高于留置针套管末端处。3.血管内皮细胞凋亡程度与留置时间有关,留置时间为96h时,血管内皮细胞出现明显凋亡现象,最佳留置时间不应超过96h。