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目的:(1)观察SD大鼠CIA模型血清中Th17/Treg细胞相关细胞因子表达情况,证实CIA模型中Th17/Treg细胞的相关细胞因子的平衡调控是否与RA病情相关,以明确Th17/Treg细胞在穴位埋线干预RA治疗中的作用机制。(2)探讨穴位埋线治疗类风湿关节炎的作用机制:抑制Th17细胞及上调Treg细胞,而达到治疗RA的目的,其可能的作用机制是TGF-β通过上调Foxp3的水平,内源性TGF-β与炎症介质IL-6诱导RORγt表达促使Th0细胞分化为Thl7细胞的过程被抑制,而后随着炎症介质如IL-6含量的减少,RORγt的功能被Foxp3所抑制,同时促进Th0细胞向Treg细胞的分化,维持Treg的功能的同时使Th17细胞的IL-21、IL-17的表达和分泌降低,抑制IL-6,TNF-α,IL-1β分泌和表达。(3)穴位埋线治疗可以有效缓解RA患者关节炎症状、延缓关节破坏,保护和维持关节功能。方法:1.分组造模:将大鼠随机分为正常对照组(初次免疫后42天处死),模型组(初次免疫后42天处死)、来氟米特组、穴位埋线组,来氟米特+穴位埋线组,每两笼为一组,共5个组,每组8只。每笼按照随机方式以苦味酸为材料(黄色)1~4进行编号。按照文献提供的方法稍加修改建立Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠模型。2.治疗方法:各组于造模第10天开始治疗。(1)空白组不作治疗。(2)模型组:予以生理盐水1ml/d灌胃。(3)穴位埋线组:参照“大鼠穴位图谱”选取“关元”及双侧“足三里”穴。从造模后第10天开始进行穴位埋线操作。将0.5cm长无菌羊肠线置入12号埋线针头内,大鼠腹面朝上固定与操作台,拉伸双后肢,将埋线针针头刺入已常规消毒的“关元”及双侧“足三里”穴,将羊肠线完全置入穴内。埋线操作3次,每14天一次,共计42天。(4)来氟米特组:每日0.6mg/100g来氟米特灌胃,从造模后第10天开始治疗。(5)来氟米特+穴位埋线组:同时进行穴位埋线及来氟米特灌胃操作。3.观测指标:血清指标:采用elisa法检测大鼠血清il-1β、il-6、il-17、tnf-α、tgf-β1的含量。病理指标:按炎性细胞浸润、巨噬a型细胞增生、滑膜增生、纤维组织增生,4个方面病理改变进行评价计分。4.统计方法:所得数据以(x±s)表示,采用spssv15.0统计软件进行统计分析,方差分析,组间采用f检验后继以q检验。5.结果:本研究发-现,穴位埋线能够有效的降低佐剂性关节炎大鼠血清中il-1β、il-6、il-17、tnf-α的含量,升高tgf-β1的水平,从两方面纠正th17/treg的失衡,同时防止炎症细胞浸润,巨噬a型细胞、滑膜及纤维组织的增生,改善佐剂性关节炎大鼠滑膜组织病理形态,从而达到减轻病情活动,阻止病情发展,防止关节出现不可逆的破坏。穴位埋线在降低th17细胞水平方面效果不亚于现有治疗类风湿性关节炎的一线用药来氟米特,且在升高treg细胞水平方面更优于来氟米特,联合应用穴位埋线及来氟米特效果更佳。6.结论:(1)sd大鼠ifa模型血清中th17细胞表达明显高于正常大鼠,而treg细胞水平则较正常大鼠有明显降低,说明th17/treg细胞的相关细胞因子的平衡确实与ra病情相关;(2)穴位埋线能够有效的降低佐剂性关节炎大鼠血清中il-1β、il-6、il-17、tnf-α的含量,升高tgf-β1的水平,抑制th17细胞及上调treg细胞,纠正th17/treg的失衡,通过升高tgf-β1的水平促treg细胞的表达,同时抑制抑制th17细胞的分化以及th17细胞因子如il-1β、il-6、il-17、tnf-α等的表达,防止炎症细胞及粘附分子在病变部位聚集、炎性细胞的浸润、血管翳的增生以及关节软骨的破坏,从而达到治疗ra的目的。其可能的作用机制是通过上调foxp3的水平,内源性tgf-β与炎症介质il-6诱导rorγt表达促使th0细胞分化为thl7细胞的过程被抑制,而后随着炎症介质如il-6含量的减少,rorγt的功能被foxp3所抑制,同时促进th0细胞向treg细胞的分化,维持treg的功能的同时使th17细胞的IL-21、IL-17的表达和分泌降低,抑制IL-6,TNF-α,IL-1β分泌和表达,具体的作用机制有待进一步研究;(3)穴位埋线治疗可以有效缓解RA患者关节炎症状、延缓关节破坏,保护和维持关节功能。穴位埋线在降低Th17细胞水平方面效果不亚于现有治疗类风湿性关节炎的一线用药来氟米特,且在升高Treg细胞水平方面更优于来氟米特,联合应用穴位埋线及来氟米特效果更佳。