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过氧化氢酶，简称CAT，普遍存在于好氧微生物和动、植物体内。作为一种酶类清除剂，可以快速有效地催化H2O2分解为H2O和O2，已被广泛应用于临床分析、食品加工、纺织、造纸、医械器具的消毒及抗肿瘤药物的研究。本论文对产过氧化氢酶海洋细菌进行了筛选鉴定、发酵条件优化、分离纯化以及部分酶学性质的研究，以期为过氧化氢酶的工业化生产及其应用提供研究基础。1.本研究利用过氧化氢平板法，再通过摇瓶检测酶活，筛选到一株高产过氧化氢酶的菌株YS0810，产酶活力达68020U/ml。通过对菌株YS0810的16SrDNA基因序列测定和同源性比对分析、形态特征及生理生化特征分析，确定该菌株为不动杆菌属（Acinetobacter）的细菌。2.为了提高海洋微生物YS0810产过氧化氢酶的水平，对其发酵条件进行了研究。首先，通过单因素实验筛选氮源、碳源、乙酸钠、无机盐、接种量、起始发酵pH、装液量、发酵温度和发酵时间这多个因素，当酶活达到最高值时，各单因素的值分别为氮源蛋白胨15g/L，碳源蔗糖20g/L，乙酸钠添加量为10g/L，无机盐MgSO4·7H2O、NaCl、KH2PO4浓度分别为0.9g/L、5g/L和1.5g/L，接种量4%，起始pH7.0，装液量50ml，培养温度25℃，发酵时间为24h；再通过Plackett-Burman设计法，评价了这8个因素对菌株YS0810过氧化氢酶产量的影响的大小，确定乙酸钠的浓度、蛋白胨浓度和蔗糖浓度为影响菌株YS0810过氧化氢酶产量的3个主要因素；利用中心组合设计及Design-Expert8.05软件分析获得了主要因素的最优条件，即乙酸钠、蛋白胨和蔗糖的浓度分别为10.36g/L、16.68g/L和16.22g/L。预测最高酶活力为6814U/ml，实验最终酶活达到6578U/ml，与未优化发酵条件相比提高了近10倍，其实验值与预测值基本相符，说明预测模型可应用于菌株YS0810过氧化氢酶发酵条件的优化。3.通过硫酸铵分级沉淀-阴离子交换层析-凝胶过滤层析方法对菌株YS0810过氧化氢酶进行分离纯化，最终获得电泳纯酶，纯化倍数为37.5，蛋白得率为19.23％，比活为112446.70U/mg。4.进行了菌株YS0810过氧化氢酶酶学性质研究，结果表明：该酶最适作用pH为12.0，在pH为6.0~10.0范围内稳定性较好；该酶最适作用温度为60℃，温度稳定性良好，温度稳定范围为30~60℃；在4℃、pH11.0的条件下保温3h酶活力保留81%，在60℃、pH7.0条件下保温30min，酶活力保留73%。经过SDS-PAGE电泳和等电聚焦电泳分别测得其亚基分子量为50kDa，等电点为5.5。通过分子筛测定其分子量约为201.2kDa，为同源四聚体。