退变性颈椎间盘成纤维细胞成骨分化的体外研究

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目的:通过对颈椎病患者蜕变的颈椎间盘纤维环纤维细胞的培养,培育出纯化的成纤维细胞,并对颈椎病患者的软骨终板细胞体外培养,制备纯化的软骨细胞。以共培养手段,使纯化软骨细胞对蜕变成纤维细胞进行诱导,验证蜕变成纤维细胞在软骨细胞诱导下是否具有成骨分化潜能,探究颈椎病骨赘形成的原因。方法:术中采集颈椎病患者颈椎间盘纤维环及软骨终板,无菌环境下送至实验室,均传代培养至第三代,冷冻保存;将纯化后细胞接种于培养皿两侧进行共培养10-14天,对成纤维细胞侧进行甲苯胺蓝染色行成骨分化鉴定。结果:成纤维细胞近软骨侧甲苯胺蓝染色出现明显的细胞质蓝染或紫红色染色,说明成纤维细胞侧出现了软骨性细胞,进而可以推断出在体外培养环境下,成纤维细胞可能会在软骨细胞的诱导下出现一定程度的骨化行为。结论:颈椎病患者蜕变的颈椎间盘纤维环细胞在软骨细胞的诱导下,有进一步成骨分化的可能性。颈椎病的成因之一,有可能是人类软骨终板的软骨细胞在一定条件下诱导蜕变的颈椎间盘纤维环细胞骨化,形成骨赘,压迫血管神经,造成颈椎病症状出现。
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