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[目的]通过前期对3例散发性结直肠癌(sporadic colorectal cancer, sCRC)癌组织DNA进行全外显子组测序,筛选出CAPN1 (Calpain I)可能为sCRC新的突变基因。CAPN1是一类存在于真核生物中,依赖Ca2+的半胱氨酸蛋白酶,它可通过水解细胞骨架、肌原纤维蛋白、膜相关蛋白及信号调控激酶等细胞酶学和信号途径中的关键蛋白来参与细胞凋亡、迁移和自噬等重要生理病理活动。本课题通过qRT-PCR和Western blot分别在mRNA和蛋白水平确定CAPN1在肠癌细胞系和正常肠细胞系中的表达；以及利用免疫组化方法检测CAPN1在肠癌组织和自身正常肠组织中的表达情况,通过增殖、迁移等功能学实验分析CAPN1对CRC细胞生物学行为的影响,进而评价CAPN1在CRC细胞中的作用。本课题的完成将为sCRC的发病机制提供新的思路,为sCRC的靶向治疗研发提供实验理论依据。[方法]1.培养人的结直肠癌细胞(HT-29,SW480,HCT 116)及正常结直肠细胞(NCM460)。2.用qRT-PCR检测4株细胞系中CAPN1 mRNA的表达。3.用Western Blot检测4株细胞系中CAPN1蛋白的表达。4.采用免疫组织化学技术检测23例肠癌组织和自身正常肠组织中CAPN1的表达情况。5.分别将CAPN1重组表达载体和空载质粒转染SW480细胞株,分析CAPN1对人SW480细胞的生物学行为的影响。[结果]1.在4种不同的细胞株中,qRT-PCR检测CAPN1的表达量从低到高依次为NCM460、HT-29、SW480、HCT 116。2.在4种不同的细胞株中,Western Blot检测CAPN1的表达量从低到高依次为NCM460、SW480、HT-29、HCT 116。3.免疫组织化学技术检测的结果显示,16例样本(69.57%)癌组织表达高于自身正常肠组织,6例样本(26.09%)癌组织与自身正常肠组织表达无差异,而癌组织比自身正常肠组织蛋白表达水平低的仅有1例(4.34%)。4.转染CAPN1重组表达载体组与转染相应空载的质粒对照组相比,SW480细胞的增殖及迁移能力明显增强,两组实验结果具有显著性差异(P<0.05)。[结论]1.CAPN1在结直肠癌组织中表达高于正常组织；1.CAPN1对SW480细胞的增殖及迁移能力均有促进作用,可能作为致癌基因参与sCRC的发生、发展。