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多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(Polygalacturonase inhibiting protein, PGIP)是一种植物细胞壁结构蛋白,可特异性结合真菌内切多聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonases, PG),从而抑制其活性,在植物抗真菌病害过程中起重要作用。本研究具体结果如下:通过PCR技术克隆了Ospgipl基因,该基因具有一930bp的完整开放阅读框(ORF),无内含子,终止密码子为TAA。将其与超表达载体pCMBIA1301连接,以农杆菌介导法转入粳稻品种徐稻3号愈伤组织超表达,并对转化植株后代进行田间抗性鉴定,筛选获得对纹枯病抗性有显著提高的水稻新品系。大田抗病性鉴定结果表明,可降低病级1.0-1.2级(9级分类标准),农艺性状与亲本无显著差异。同法克隆Ospgip2基因,该基因具有1029bp的完整开放阅读框(ORF),无内含子,终止密码子为TAA。生物信息学分析表明,OsPGIP2由342个氨基酸组成,含有10个LRR重复序列。将对水稻纹枯病菌PG无抑制活性的OsPGIP2LRR区氨基酸进行点突变,通过对表达产物的提取和测定,选择表达产物获得对PG抑制活性的突变体转入水稻,以期获得抗性明显提高的水稻抗纹枯病新品系。据相关文献与生物学信息分析结果设计引物,分别替换OsPGIP2LRR区3个氨基酸,获得突变体OsPGIP2L233F、OsPGIP2R253Q和OsPGIP2Q300H。突变体原核表达结果表明,将OsPGIP2第233位氨基酸由L突变成F时,可使得对水稻纹枯病菌PG无抑制活性的OsPGIP2获得抑制活性,活力为876U/mL。将突变基因转入载体pCMBIA1301超表达后,以农杆菌介导的方法转化水稻愈伤。苗期抗性鉴定结果表明,获得的无性系苗期对R. solani抗性增强且发病时间延迟。